PLH

PLH-cellelinjen er en Epstein-Barr-virus (EBV)-transformeret human lymfoblastoid-cellelinje, der stammer fra en patient med medfødt binyrebarkhyperplasi (CAH) på grund af steroid 21-hydroxylase (21-OHase)-mangel. Denne autosomale recessive lidelse, som nedsætter biosyntesen af kortisol, er stærkt knyttet til specifikke HLA-haplotyper, især HLA-Bw47;DR7. PLH-linjen er homozygot for denne haplotype og er blevet brugt som en genetisk model til at undersøge det molekylære grundlag for 21-OHase-mangel. Den er især værdifuld til at studere gensletninger, der påvirker cytokrom P-450C21-genet, som er ansvarlig for 21-hydroxylering, et afgørende trin i produktionen af kortisol. Molekylære analyser med DNA-prober bekræftede, at PLH-celler udviser en homozygot deletion af et af de to P-450C21-gener, hvilket stemmer overens med det tab af 21-hydroxylaseaktivitet, der er observeret hos de berørte personer.

PLH-cellelinjen var en del af Fourth Asia-Oceania Histocompatibility Workshop (4AOHW)-panelet, som havde til formål at tilvejebringe et velkarakteriseret sæt EBV-transformerede lymfoblastoide cellelinjer, der repræsenterer forskellige MHC-alleler og haplotyper. Disse paneler fungerer som vigtige ressourcer for histokompatibilitetsstudier, udvikling af HLA-typning og immunogenetisk forskning. Udvælgelsen af PLH til 4AOHW afspejlede dens unikke MHC-genotype og sygdomsrelevans, hvilket bidrager til både standardiseringen af HLA-alleltildelinger og undersøgelser, der udforsker den genetiske arkitektur af immunrelaterede lidelser.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring