PLH

PLH rakuliin on Epstein-Barri viiruse (EBV) transformeeritud inimese lümfoblastoidide rakuliin, mis on saadud patsiendilt, kellel on steroidide 21-hüdroksülaasi (21-OHase) puudulikkuse tõttu kaasasündinud neerupealiste hüperplaasia (CAH). See autosoomne retsessiivne häire, mis kahjustab kortisooli biosünteesi, on tugevalt seotud spetsiifiliste HLA-haplotüüpidega, eriti HLA-Bw47;DR7. PLH liin on selle haplotüübi suhtes homosügootne ja seda on kasutatud geneetilise mudelina 21-OHase puudulikkuse molekulaarse aluse uurimiseks. Eriti väärtuslik on see geenideletsioonide uurimiseks, mis mõjutavad tsütokroom P-450C21 geeni, mis vastutab 21-hüdroksüülimise eest, mis on oluline etapp kortisooli tootmisel. Molekulaaranalüüsid DNA-sondide abil kinnitasid, et PLH-rakkudes on homosügootne deletsioon ühes kahest P-450C21 geenist, mis on kooskõlas 21-hüdroksülaasi aktiivsuse kadumisega, mida on täheldatud mõjutatud isikutel.

PLH rakuliin oli osa neljandast Aasia-Okeaania histokompatibility Workshop (4AOHW) paneelist, mille eesmärk oli pakkuda hästi iseloomustatud EBV-transformeeritud lümfoblastoidsete rakuliinide komplekti, mis esindavad erinevaid MHC-alleele ja haplotüüpe. Need paneelid on olulised ressursid histokompatistentsuse uuringutes, HLA-tüüpide väljatöötamisel ja immunogeneetika uurimisel. PLH valimine 4AOHW-sse lisamiseks kajastab selle ainulaadset MHC-genotüüpi ja haiguste tähtsust, aidates kaasa nii HLA alleelide määramise standardimisele kui ka immuunsüsteemiga seotud haiguste geneetilist struktuuri uurivatele uuringutele.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest