PLH

De PLH-cellijn is een Epstein-Barr virus (EBV)-getransformeerde humane lymfoblastoïde cellijn afkomstig van een patiënt met congenitale bijnierhyperplasie (CAH) als gevolg van steroïde 21-hydroxylase (21-OHase)-deficiëntie. Deze autosomaal recessieve aandoening, die de biosynthese van cortisol belemmert, is sterk gekoppeld aan specifieke HLA haplotypes, met name HLA-Bw47;DR7. De PLH-lijn is homozygoot voor dit haplotype en is gebruikt als genetisch model om de moleculaire basis van 21-OHase deficiëntie te onderzoeken. Ze is vooral waardevol bij het bestuderen van gen-deleties die het cytochroom P-450C21-gen beïnvloeden, dat verantwoordelijk is voor 21-hydroxylering, een cruciale stap in de cortisolproductie. Moleculaire analyses met behulp van DNA-sondes bevestigden dat PLH-cellen een homozygote deletie van een van de twee P-450C21-genen vertonen, wat consistent is met het verlies van 21-hydroxylase activiteit dat wordt waargenomen bij getroffen individuen.

De PLH-cellijn maakte deel uit van het Fourth Asia-Oceania Histocompatibility Workshop (4AOHW)-panel, dat bedoeld was om een goed gekarakteriseerde set EBV-getransformeerde lymfoblastoïde cellijnen te leveren die verschillende MHC-allelen en haplotypen vertegenwoordigen. Deze panels dienen als essentiële bronnen voor histocompatibiliteitsstudies, ontwikkeling van HLA-typeringen en immunogenetisch onderzoek. De selectie van PLH voor opname in de 4AOHW weerspiegelde haar unieke MHC-genotype en ziekterelevantie, wat bijdraagt aan zowel de standaardisatie van HLA alleltoewijzingen als studies die de genetische architectuur van immuungerelateerde aandoeningen onderzoeken.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring