PLH

Bunková línia PLH je ľudská lymfoblastoidná bunková línia transformovaná vírusom Epsteina-Barrovej (EBV), získaná od pacienta s vrodenou hyperpláziou nadobličiek (CAH) v dôsledku deficitu steroidnej 21-hydroxylázy (21-OHázy). Táto autozomálne recesívna porucha, ktorá narúša biosyntézu kortizolu, je silne spojená so špecifickými haplotypmi HLA, najmä HLA-Bw47;DR7. Línia PLH je homozygotná pre tento haplotyp a používa sa ako genetický model na skúmanie molekulárnej podstaty deficitu 21-OHázy. Je obzvlášť cenná pri štúdiu génových delécií ovplyvňujúcich gén cytochrómu P-450C21, ktorý je zodpovedný za 21-hydroxyláciu, kľúčový krok pri produkcii kortizolu. Molekulárne analýzy pomocou sond DNA potvrdili, že PLH bunky vykazujú homozygotnú deléciu jedného z dvoch génov P-450C21, čo zodpovedá strate aktivity 21-hydroxylázy pozorovanej u postihnutých jedincov.

Bunková línia PLH bola súčasťou panelu 4AOHW (Fourth Asia-Oceania Histocompatibility Workshop), ktorého cieľom bolo poskytnúť dobre charakterizovaný súbor lymfoblastoidných bunkových línií transformovaných EBV, ktoré reprezentujú rôzne alely a haplotypy MHC. Tieto panely slúžia ako základné zdroje pre štúdie histokompatibility, vývoj typizácie HLA a imunogenetický výskum. Výber PLH na zaradenie do 4AOHW odzrkadľuje jeho jedinečný genotyp MHC a význam pre ochorenia, čo prispieva k štandardizácii priradenia alel HLA a k štúdiám skúmajúcim genetickú štruktúru porúch súvisiacich s imunitou.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke