Pereiti prie turinio
SK-BR-3-Luc
Audinys
Metastazių
Liga
Krūties adenokarcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros

Dokumentai

SK-BR-3-Luc

Cell line · Prekės numeris 305709

SK-BR-3-Luc yra bioliuminescencinis žmogaus SK-BR-3 krūties adenokarcinomos ląstelių linijos darinys, modifikuotas taip, kad stabiliai ekspresuotų jonvabalių liuciferazės reporterį...

€777.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SK-BR-3-Luc yra bioliuminescencinis žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelių linijos SK-BR-3 darinys, genetiškai modifikuotas taip, kad stabiliai ekspresuotų žibintuvėlio liuciferazės reporterinį geną. Pirminė SK-BR-3 ląstelių linija buvo sukurta iš 43 metų amžiaus kaukazietės pacientės krūties adenokarcinomos metastazės pleuros išsiliejime ir pasižymi HER2 (ERBB2) geno amplifikacija bei perprodukcija, todėl ji klasifikuojama kaip HER2-teigiamas krūties vėžio modelis. SK-BR-3 ląstelės auga epitelio tipo monosluoksniu ir yra plačiai naudojamos HER2 reguliuojamo krūties vėžio biologijai tirti bei HER2 taikiniais terapijoms vertinti, įskaitant trastuzumabą, lapatinibą, pertuzumabą ir antikūnų-vaistų konjugatus, pvz., trastuzumabą-derukstekaną.

Stabili luciferazės integracija į SK-BR-3-Luc ląsteles leidžia atlikti jautrų, kiekybinį bioluminescencinį vaizdavimą (BLI), vertinant naviko apimtį ksenotransplantacijos modeliuose imuninės sistemos susilpnėjusių recipientų organizmuose. Išspinduliuotas liuminescencinis signalas koreliuoja su gyvybingų naviko ląstelių skaičiumi, o tai leidžia neinvaziniu būdu stebėti naviko prigijimą, augimo kinetiką ir reakciją į gydymą. SK-BR-3-Luc yra ypač vertinga atliekant priešklinikinį anti-HER2 preparatų, ADC, bispecifinių antikūnų ir kombinuotų strategijų, nukreiptų į HER2 signalizacijos ašį krūties vėžio atveju, vertinimą, taip pat atliekant didelio našumo vaistų atranką ir in vivo farmakodinaminius tyrimus.

SK-BR-3-Luc išlaiko nustatytą HER2 amplifikuotą molekulinį fenotipą ir augimo charakteristikas, būdingas pirminės SK-BR-3 linijos ląstelėms. Liuciferazės reporteris žymiai padidina eksperimentų našumą ir jautrumą atliekant in vivo vaizdinimo tyrimus. Prieš pradedant didelio masto ikiklinikinį naudojimą, tyrėjai turėtų patvirtinti liuciferazės aktyvumą, HER2 amplifikacijos būklę ir augimo kinetiką savo konkrečiomis eksperimentinėmis sąlygomis.

Audinys
Metastazių
Liga
Krūties adenokarcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms susidaro silpnai diferencijuota adenokarcinoma

04Identifikatoriai

Nuoroda
SK-BR-3-Luc (Cytion katalogo numeris 305709)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Kraujo grupė A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (vabalas, kodonų optimizuotas)
Izofermentai
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotipo dažnio produktas: 0.0044
Mutacijų profilis
Mutacija: p.Arg175His, homozigotinė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
McCoys 5A vidutinė (modifikuota), w: 3,0 g/l gliukozės, w: stabilus glutaminas, w: 2,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/l NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
2–4 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
43 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių