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SK-BR-3-Luc
Gewebe
Metastasen
Krankheit
Adenokarzinom der Brust
Metastasenherd
Pleuraerguss

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SK-BR-3-Luc

Cell line · Artikelnummer 305709

SK-BR-3-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der menschlichen SK-BR-3-Brustadenokarzinom-Zelllinie, das so gentechnisch verändert wurde, dass es stabil ein Firefly-Luciferase-Reportergen exprimiert...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

SK-BR-3-Luc ist ein biolumineszierendes Derivat der menschlichen SK-BR-3-Brustadenokarzinom-Zelllinie, das so modifiziert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche SK-BR-3-Zelllinie wurde aus einer Pleuraerguss-Metastase eines Brustadenokarzinoms bei einer 43-jährigen kaukasischen Patientin etabliert und ist durch eine HER2 (ERBB2)-Genamplifikation und -Überexpression gekennzeichnet, wodurch sie als HER2-positives Brustkrebsmodell eingestuft wird. SK-BR-3-Zellen weisen ein epithelähnliches Monoschichtwachstum auf und werden häufig zur Untersuchung der Biologie von HER2-getriebenem Brustkrebs sowie zur Bewertung von HER2-gerichteten Therapien wie Trastuzumab, Lapatinib, Pertuzumab und Antikörper-Wirkstoff-Konjugaten wie Trastuzumab-Deruxtecan eingesetzt.

Die stabile Integration von Luciferase in SK-BR-3-Luc ermöglicht eine empfindliche, quantitative Biolumineszenz-Bildgebung (BLI) der Tumorlast in Xenotransplantatmodellen bei immungeschwächten Wirten. Das emittierte Lumineszenzsignal korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Tumorzellen und ermöglicht so eine nichtinvasive Langzeitüberwachung der Tumoransiedlung, der Wachstumskinetik und des Ansprechens auf die Therapie. SK-BR-3-Luc ist besonders wertvoll für die präklinische Bewertung von Anti-HER2-Wirkstoffen, ADCs, bispezifischen Antikörpern und Kombinationsstrategien, die auf die HER2-Signalachse bei Brustkrebs abzielen, sowie für das Hochdurchsatz-Wirkstoffscreening und pharmakodynamische In-vivo-Studien.

SK-BR-3-Luc behält den etablierten molekularen Phänotyp mit HER2-Amplifikation sowie die Wachstumseigenschaften der Elternzelllinie SK-BR-3 bei. Der Luziferase-Reporter erhöht den experimentellen Durchsatz und die Empfindlichkeit für In-vivo-Bildgebungsstudien erheblich. Forscher sollten die Luziferase-Aktivität, den HER2-Amplifikationsstatus und die Wachstumskinetik unter ihren spezifischen Versuchsbedingungen vor dem groß angelegten präklinischen Einsatz bestätigen.

Gewebe
Metastasen
Krankheit
Adenokarzinom der Brust
Metastasenherd
Pleuraerguss

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, bildet in Nacktmäusen schwach differenzierte Adenokarzinome

04Bezeichner

Quellenangabe
SK-BR-3-Luc (Cytion-Katalognummer 305709)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Blutgruppe A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (Glühwürmchen, codonoptimiert)
Isoenzyme
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0044
Mutationsprofil
Mutation: p.Arg175His, homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
McCoys 5A Medium (modifiziert), w: 3,0 g/l Glukose, w: stabiles Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/l NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
2–4 × 10⁴ Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
43 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch