Tartalomra ugrás
SK-BR-3-Luc
Szövet
Metasztatikus
Betegség
Mell adenokarcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem

Dokumentumok

SK-BR-3-Luc

Cell line · Termékszám 305709

Az SK-BR-3-Luc az emberi SK-BR-3 emlő-adenokarcinóma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a szentjánosbogár-luciferáz riportert...

€777.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az SK-BR-3-Luc az emberi SK-BR-3 emlő-adenokarcinóma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a szentjánosbogár-luciferáz riportergént. Az eredeti SK-BR-3 sejtvonalat egy 43 éves kaukázusi női beteg emlőadenokarcinómájának pleurális folyadékgyülemben előforduló metasztázisából állították elő, és a HER2 (ERBB2) gén amplifikációja és túltermelése jellemzi, ami HER2-pozitív emlőrák-modellként sorolja be. Az SK-BR-3 sejtek epiteliális jellegű egyrétegű növekedést mutatnak, és széles körben használják a HER2-vezérelt emlőrák biológiájának tanulmányozására, valamint a HER2-t célzó terápiák – köztük a trastuzumab, a lapatinib, a pertuzumab és az olyan antitest-gyógyszer konjugátumok, mint a trastuzumab-deruxtecan – értékelésére.

A SK-BR-3-Luc sejtekbe integrált stabil luciferáz lehetővé teszi a tumorterhelés érzékeny, kvantitatív biolumineszcens képalkotását (BLI) immunhiányos gazdaszervezetekben kialakított xenotranszplantációs modellekben. A kibocsátott lumineszcens jel korrelál az életképes tumorsejtek számával, ami lehetővé teszi a tumor beültetésének, növekedési kinetikájának és a terápiás válaszra adott reakciójának nem invazív, longitudinális monitorozását. Az SK-BR-3-Luc különösen értékes az anti-HER2 szerek, az ADC-k, a bispecifikus antitestek és a mellrákban a HER2 jelátviteli tengelyt célzó kombinációs stratégiák preklinikai értékeléséhez, valamint a nagy áteresztőképességű gyógyszerszűréshez és az in vivo farmakodinamikai vizsgálatokhoz.

Az SK-BR-3-Luc megőrzi az anyavonal, az SK-BR-3 jól ismert HER2-amplifikált molekuláris fenotípusát és növekedési jellemzőit. A luciferáz-riporter jelentősen növeli a kísérleti áteresztőképességet és az érzékenységet az in vivo képalkotó vizsgálatok során. A kutatóknak a nagyszabású preklinikai alkalmazás előtt saját kísérleti körülményeik között meg kell erősíteniük a luciferáz-aktivitást, a HER2-amplifikáció állapotát és a növekedési kinetikát.

Szövet
Metasztatikus
Betegség
Mell adenokarcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben gyengén differenciált adenokarcinómát képez

04Azonosítók

Hivatkozás
SK-BR-3-Luc (Cytion katalógusszám: 305709)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
A vércsoport, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)
Izoenzimek
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotípus gyakorisági termék: 0.0044
Mutációs profil
Mutáció: p.Arg175His, homozigóta

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
McCoys 5A közepes (módosított), w: 3,0 g/l glükóz, w: stabil glutamin, w: 2,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,2 g/l NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
43 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi