Ga naar de inhoud
SK-BR-3-Luc
Weefsel
Uitgezaaid
Ziekte
Borstadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie

Documenten

SK-BR-3-Luc

Cell line · Productnummer 305709

SK-BR-3-Luc is een bioluminescent derivaat van de menselijke SK-BR-3-borstadenocarcinoomcellijn, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reporter te tot expressie te brengen...

€777.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

SK-BR-3-Luc is een bioluminescent derivaat van de menselijke SK-BR-3-celijn van het borstadenocarcinoom, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke SK-BR-3-cellijn is opgezet uit een metastase in de pleurale effusie van een borstadenocarcinoom bij een 43-jarige blanke vrouwelijke patiënt en wordt gekenmerkt door HER2 (ERBB2)-genamplificatie en -overexpressie, waardoor deze wordt geclassificeerd als een HER2-positief borstkankermodel. SK-BR-3-cellen vertonen epitheelachtige monolaaggroei en worden op grote schaal gebruikt voor het bestuderen van de biologie van HER2-gedreven borstkanker en voor het evalueren van op HER2 gerichte therapieën, waaronder trastuzumab, lapatinib, pertuzumab en antilichaam-geneesmiddelconjugaten zoals trastuzumab-deruxtecan.

De stabiele integratie van luciferase in SK-BR-3-Luc maakt gevoelige, kwantitatieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) van de tumorbelasting in xenotransplantaatmodellen bij immuungecompromitteerde gastheerorganismen mogelijk. Het uitgezonden luminescentiesignaal correleert met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat niet-invasieve longitudinale monitoring van tumorengrafting, groeikinetiek en therapeutische respons mogelijk maakt. SK-BR-3-Luc is met name waardevol voor de preklinische evaluatie van anti-HER2-middelen, ADC’s, bispecifieke antilichamen en combinatiestrategieën gericht op de HER2-signaalroute bij borstkanker, evenals voor high-throughput-geneesmiddelenscreening en in vivo farmacodynamische studies.

SK-BR-3-Luc behoudt het gevestigde HER2-geamplificeerde moleculaire fenotype en de groeikenmerken van de oorspronkelijke SK-BR-3-lijn. De luciferase-reporter verhoogt de experimentele doorvoer en gevoeligheid voor in-vivo-beeldvormingsonderzoeken aanzienlijk. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, de status van de HER2-amplificatie en de groeikinetiek onder hun specifieke experimentele omstandigheden te verifiëren alvorens het op grote schaal voor preklinisch gebruik in te zetten.

Weefsel
Uitgezaaid
Ziekte
Borstadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen, vormt slecht gedifferentieerd adenocarcinoom

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SK-BR-3-Luc (Cytion-catalogusnummer 305709)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Bloedgroep A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
Iso-enzymen
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotype Frequentie Product: 0.0044
Mutatieprofiel
Mutatie: p.Arg175His, homozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
McCoys 5A medium (aangepast), w: 3,0 g/l glucose, w: stabiel glutamine, w: 2,0 mM natriumpyruvaat, w: 2,2 g/l NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
2–4 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
43 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch