Pāriet uz saturu
SK-BR-3-Luc
Audums
Metastātisks
Slimība
Krūts adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums

Dokumenti

SK-BR-3-Luc

Cell line · Preces numurs 305709

SK-BR-3-Luc ir cilvēka SK-BR-3 krūts adenokarcinomas šūnu līnijas bioluminiscējošs atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskrēsliņa luciferāzes reportergēnu...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SK-BR-3-Luc ir cilvēka SK-BR-3 krūts adenokarcinomas šūnu līnijas bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā SK-BR-3 šūnu līnija tika izveidota no 43 gadus vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes pacienta krūts adenokarcinomas pleiras izplūdes metastāzes un tai raksturīga HER2 (ERBB2) gēna amplifikācija un pārmērīga ekspresija, tādējādi to klasificējot kā HER2-pozitīvu krūts vēža modeli. SK-BR-3 šūnas izrāda epitēlija tipa monoslāņa augšanu un tiek plaši izmantotas, lai pētītu HER2-izraisītā krūts vēža bioloģiju un novērtētu HER2 mērķtiecīgas terapijas, tostarp trastuzumabu, lapatinibu, pertuzumabu un antivielu-zāļu konjugātus, piemēram, trastuzumabu-derukstekanu.

Stabilā luciferāzes integrācija SK-BR-3-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, kvantitatīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), novērtējot audzēja apjomu ksenotransplantātu modeļos imūndeficītiem saņēmējiem. Izstarotais luminescences signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, tādējādi atbalstot neinvazīvu audzēja ieaugšanas, augšanas kinētikas un terapeitiskās atbildes garenvirziena novērošanu. SK-BR-3-Luc ir īpaši vērtīgs anti-HER2 līdzekļu, ADC, bispecifisko antivielu un kombinēto stratēģiju, kas vērstas uz HER2 signālvadības asi krūts vēža gadījumā, pirmsklīniskai novērtēšanai, kā arī augstas caurlaidspējas zāļu skrīningam un in vivo farmakodinamiskajiem pētījumiem.

SK-BR-3-Luc saglabā izstrādāto HER2 amplificēto molekulāro fenotipu un augšanas īpašības, kas raksturīgas sākotnējai SK-BR-3 līnijai. Luciferāzes reportera klātbūtne ievērojami palielina eksperimentālo caurlaidspēju un jutību in vivo attēlveidošanas pētījumos. Pirms plaša mēroga pirmsklīniskas izmantošanas pētniekiem ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, HER2 amplifikācijas statuss un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Metastātisks
Slimība
Krūts adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm veido vāji diferencētu adenokarcinomu

04Identifikatori

Atsauce
SK-BR-3-Luc (Cytion kataloga numurs 305709)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Asinsgrupa A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (spožā mušiņa, kodona optimizēta)
Izoenzīmi
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotipu biežuma produkts: 0.0044
Mutāciju profils
Mutācija: p.Arg175His, homozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
McCoys 5A vidēja (modificēta), satura: 3,0 g/l glikozes, satura: stabila glutamīna, satura: 2,0 mM nātrija piruvāta, satura: 2,2 g/l NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
43 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis