Przejdź do treści
SK-BR-3-Luc
Chusteczka
Przerzuty
Choroba
Gruczolakorak piersi
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy

Dokumenty

SK-BR-3-Luc

Cell line · Numer produktu 305709

SK-BR-3-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej gruczolakoraka piersi SK-BR-3, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji reporteru opartego na lucyferazie świetlika...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

SK-BR-3-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej gruczolakoraka piersi SK-BR-3, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa SK-BR-3 została wyizolowana z przerzutu do wysięku opłucnowego pochodzącego z gruczolakoraka piersi u 43-letniej pacjentki rasy kaukaskiej i charakteryzuje się amplifikacją oraz nadekspresją genu HER2 (ERBB2), co klasyfikuje ją jako model raka piersi HER2-dodatniego. Komórki SK-BR-3 wykazują wzrost w postaci monowarstwy o charakterze nabłonkowym i są szeroko stosowane do badania biologii raka piersi wywołanego przez HER2 oraz do oceny terapii ukierunkowanych na HER2, w tym trastuzumabu, lapatynibu, pertuzumabu oraz koniugatów przeciwciało-lek, takich jak trastuzumab-derukstekan.

Stabilna integracja lucyferazy w linii komórkowej SK-BR-3-Luc umożliwia czułe, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach przeszczepów heterogenicznych u gospodarzy z obniżoną odpornością. Emitowany sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, co umożliwia nieinwazyjne, podłużne monitorowanie przyżycia guza, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leczenie. Linia SK-BR-3-Luc jest szczególnie przydatna do przedklinicznej oceny leków anty-HER2, koniugatów przeciwciało-lek (ADC), przeciwciał bispecyficznych oraz strategii skojarzonych ukierunkowanych na oś sygnałową HER2 w raku piersi, a także do wysokoprzepustowego przesiewania leków i badań farmakodynamicznych in vivo.

SK-BR-3-Luc zachowuje ustalony fenotyp molekularny z amplifikacją HER2 oraz cechy wzrostu macierzystej linii komórkowej SK-BR-3. Reporter lucyferazy znacznie zwiększa wydajność eksperymentalną oraz czułość badań obrazowania in vivo. Przed zastosowaniem na dużą skalę w badaniach przedklinicznych naukowcy powinni potwierdzić aktywność lucyferazy, status amplifikacji HER2 oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Przerzuty
Choroba
Gruczolakorak piersi
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy tworzy słabo zróżnicowanego gruczolakoraka

04Identyfikatory

Źródło
SK-BR-3-Luc (numer katalogowy Cytion 305709)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Grupa krwi A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (świecąca świetlika, zoptymalizowana pod kątem kodonów)
Izoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, produkt częstotliwości fenotypu: 0.0044
Profil mutacji
Mutacja: p.Arg175His, homozygotyczna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Pożywka McCoys 5A średnia (zmodyfikowana), w: 3,0 g/l glukozy, w: stabilna glutamina, w: 2,0 mM pirogronianu sodu, w: 2,2 g/l NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
2–4 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
43 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski