SK-BR-3-Luc
Cell line · Product number 305709
SK-BR-3-Luc is a bioluminescent derivative of the human SK-BR-3 breast adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporte...
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01General information
- Description
SK-BR-3-Luc es un derivado bioluminiscente de la línea celular humana SK-BR-3 de adenocarcinoma de mama, modificada genéticamente para expresar de manera estable un gen reportero de luciferasa de luciérnaga. La línea celular parental SK-BR-3 se estableció a partir de una metástasis en el derrame pleural de un adenocarcinoma de mama en una paciente caucásica de 43 años y se caracteriza por la amplificación y sobreexpresión del gen HER2 (ERBB2), lo que la clasifica como un modelo de cáncer de mama HER2-positivo. Las células SK-BR-3 presentan un crecimiento en monocapa de tipo epitelial y se utilizan ampliamente para estudiar la biología del cáncer de mama impulsado por HER2 y para evaluar terapias dirigidas contra HER2, entre ellas el trastuzumab, el lapatinib, el pertuzumab y conjugados de anticuerpos y fármacos como el trastuzumab-deruxtecan.
La integración estable de luciferasa en SK-BR-3-Luc permite la obtención de imágenes por bioluminiscencia (BLI) sensibles y cuantitativas de la carga tumoral en modelos de xenoinjertos en huéspedes inmunodeprimidos. La señal luminiscente emitida se correlaciona con el número de células tumorales viables, lo que permite el monitoreo longitudinal no invasivo del injerto tumoral, la cinética de crecimiento y la respuesta terapéutica. SK-BR-3-Luc es particularmente valioso para la evaluación preclínica de agentes anti-HER2, ADC, anticuerpos biespecíficos y estrategias combinadas dirigidas al eje de señalización de HER2 en el cáncer de mama, así como para el cribado de fármacos de alto rendimiento y los estudios farmacodinámicos in vivo.
SK-BR-3-Luc conserva el fenotipo molecular establecido de amplificación de HER2 y las características de crecimiento de la línea parental SK-BR-3. El reportero de luciferasa mejora sustancialmente el rendimiento experimental y la sensibilidad para los estudios de imágenes in vivo. Los investigadores deben confirmar la actividad de la luciferasa, el estado de amplificación de HER2 y la cinética de crecimiento en sus condiciones experimentales específicas antes de su uso preclínico a gran escala.
- Tissue
- Metastático
- Disease
- Adenocarcinoma de mama
- Metastatic site
- Derrame pleural
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Sí, en ratones desnudos, se forma un adenocarcinoma poco diferenciado
04Identifiers
- Citation
- SK-BR-3-Luc (número de catálogo de Cytion 305709)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y11
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Tipo sanguíneo A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (luciérnaga, optimizado por codón)
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, producto de la frecuencia fenotípica: 0,0044
- Mutational profile
- Mutación: p.Arg175His, homocigótica
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5A medio (modificado), p/v: 3,0 g/L de glucosa, p/v: glutamina estable, p/v: 2,0 mM de piruvato de sodio, p/v: 2,2 g/L de NaHCO₃ (Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Split ratio
- 1 a 3
- Seeding density
- 2-4 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 43 años
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
