Mine otse sisu juurde
SK-BR-3-Luc
Kude
Metastaatiline
Haigus
Rinna adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon

Dokumendid

SK-BR-3-Luc

Cell line · Toote number 305709

SK-BR-3-Luc on inimese SK-BR-3 rinnavähi adenokartsinoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud, et stabiilselt ekspresseerida tulikärbse lusiferase reportergeeni...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SK-BR-3-Luc on inimese SK-BR-3 rindade adenokartsinoomi rakuliini bioluminestsentsne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud tulikärbse lucifereasi reportergeeni stabiilseks ekspresseerimiseks. Algrakuliin SK-BR-3 loodi 43-aastase valgenahalise naispatsiendi rinnavähi adenokartsinoomi pleuraefusioonimetastaasist ning seda iseloomustab HER2 (ERBB2) geeni amplifikatsioon ja üliekspressioon, mistõttu klassifitseeritakse seda HER2-positiivse rinnavähi mudeliks. SK-BR-3 rakud kasvavad epiteelilaadse ühekihilise kihina ja neid kasutatakse laialdaselt HER2-põhise rinnavähi bioloogia uurimiseks ning HER2-le suunatud ravimeetodite, sealhulgas trastuzumabi, lapatiniibi, pertuzumabi ja antikeha-ravimkonjugaatide (nt trastuzumab-derukstekaan) hindamiseks.

Stabiilne lusiferase integratsioon SK-BR-3-Luc-is võimaldab immuunpuudulikkusega peremeesorganismides ksenotransplantaadi mudelite kasvajakoormuse tundlikku ja kvantitatiivset bioluminestsentskuvamist (BLI). Kiiratav luminestsentssignaal korreleerub eluvõimeliste kasvajarakkude arvuga, võimaldades kasvajate juurdumise, kasvukineetika ja ravivastuse mitteinvasiivset pikaajalist jälgimist. SK-BR-3-Luc on eriti väärtuslik anti-HER2-ravimite, ADC-de, bispetsiifiliste antikehade ja HER2-signaalimisteed sihtivate kombinatsioonistrateegiate prekliiniliseks hindamiseks rinnavähi puhul, samuti suure läbilaskevõimega ravimite sõelumiseks ja in vivo farmakodünaamilisteks uuringuteks.

SK-BR-3-Luc säilitab emaliini SK-BR-3 väljakujunenud HER2-amplifitseeritud molekulaarse fenotüübi ja kasvukarakteristikud. Lusiferase-reporter suurendab oluliselt eksperimentaalse läbilaskevõimet ja tundlikkust in vivo pildistamisuuringutes. Enne laiaulatuslikku prekliinilist kasutamist peaksid teadlased oma konkreetsetes katsetingimustes kinnitama lusiferaasi aktiivsuse, HER2-amplifikatsiooni olemasolu ja kasvukineetika.

Kude
Metastaatiline
Haigus
Rinna adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, moodustab alasti hiirtel halvasti diferentseerunud adenokartsinoomi

04Tunnused

Viide
SK-BR-3-Luc (Cytioni kataloognumber 305709)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Vererühm A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0044
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: p.Arg175His, homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
McCoys 5A keskmise koostisega (modifitseeritud) keskkond: glükoos 3,0 g/l, stabiilne glutamiin, naatriumpüruvaat 2,0 mM, NaHCO₃ 2,2 g/l (Cytion 820200a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
2–4 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
43 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia