
- Tissue
- Métastatique
- Disease
- Adénocarcinome du sein
- Metastatic site
- Épanchement pleural
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SK-BR-3-Luc
Cell line · Product number 305709
SK-BR-3-Luc is a bioluminescent derivative of the human SK-BR-3 breast adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporte...
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01General information
- Description
SK-BR-3-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine SK-BR-3 d’adénocarcinome mammaire, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur de luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale SK-BR-3 a été établie à partir d’une métastase dans un épanchement pleural d’un adénocarcinome du sein chez une patiente caucasienne de 43 ans; elle se caractérise par une amplification et une surexpression du gène HER2 (ERBB2), ce qui la classe parmi les modèles de cancer du sein HER2-positifs. Les cellules SK-BR-3 présentent une croissance en monocouche de type épithélial et sont largement utilisées pour étudier la biologie du cancer du sein HER2-dépendant et pour évaluer les thérapies ciblant HER2, notamment le trastuzumab, le lapatinib, le pertuzumab et les conjugués anticorps-médicaments tels que le trastuzumab-deruxtecan.
L’intégration stable de la luciférase dans la lignée SK-BR-3-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et quantitative de la charge tumorale dans des modèles de xénogreffes chez des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal non invasif de la prise de greffe, de la cinétique de croissance et de la réponse thérapeutique. La lignée SK-BR-3-Luc est particulièrement utile pour l’évaluation préclinique d’agents anti-HER2, d’ADC, d’anticorps bispécifiques et de stratégies combinées ciblant l’axe de signalisation HER2 dans le cancer du sein, ainsi que pour le criblage de médicaments à haut débit et les études pharmacodynamiques in vivo.
SK-BR-3-Luc conserve le phénotype moléculaire établi d’amplification de HER2 et les caractéristiques de croissance de la lignée parentale SK-BR-3. Le rapporteur luciférase améliore considérablement le débit expérimental et la sensibilité des études d’imagerie in vivo. Les chercheurs doivent confirmer l’activité de la luciférase, le statut d’amplification de HER2 et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation préclinique à grande échelle.
- Tissue
- Métastatique
- Disease
- Adénocarcinome du sein
- Metastatic site
- Épanchement pleural
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Tumourigenic
- Oui, chez les souris nues, il se développe un adénocarcinome peu différencié
04Identifiers
- Citation
- SK-BR-3-Luc (numéro de catalogue Cytion 305709)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y11
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Groupe sanguin A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (luciole, codon optimisé)
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, produit de la fréquence du phénotype : 0,0044
- Mutational profile
- Mutation : p.Arg175His, homozygote
06Handling and culture
- Culture medium
- Milieu McCoys 5A (modifié) : 3,0 g/L de glucose, glutamine stable, 2,0 mM de pyruvate de sodium, 2,2 g/L de NaHCO₃ (Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Split ratio
- 1 à 3
- Seeding density
- 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 43 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes