SK-BR-3-Luc
Cell line · Product number 305709
SK-BR-3-Luc is a bioluminescent derivative of the human SK-BR-3 breast adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporte...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
SK-BR-3-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי SK-BR-3 של אדנוקרצינומה בשד, שהונדסה כך שתבטא באופן יציב גן דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים SK-BR-3 המקורי הוקם מתוך גרורה של אדנוקרצינומה של השד שהתגלתה בנוזל הפלאורלי של מטופלת לבנה בת 43, והוא מאופיין בהגברה וביטוי-יתר של הגן HER2 (ERBB2), מה שמסווג אותו כמודל לסרטן שד חיובי ל-HER2. תאי SK-BR-3 מציגים צמיחה בשכבה חד-תאית דמוית אפיתל, והם נמצאים בשימוש נרחב לחקר הביולוגיה של סרטן השד המונע על ידי HER2 ולהערכת טיפולים המכוונים ל-HER2, כולל טראסטוזומאב, לפטיניב, פרטוזומאב, ותרכובות נוגדן-תרופה כגון טראסטוזומאב-דרוקסטקאן.
השילוב היציב של לוקיפרז ב-SK-BR-3-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלים זרים במאכסנים בעלי מערכת חיסון מוחלשת. האות הזוהר הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, ומאפשר מעקב ארוך טווח ולא פולשני אחר השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה ותגובת הטיפול. SK-BR-3-Luc הוא בעל ערך רב במיוחד להערכה פרה-קלינית של חומרים נגד HER2, ADCs, נוגדנים דו-ספציפיים ואסטרטגיות שילוב המכוונות לציר האיתות של HER2 בסרטן השד, כמו גם לסינון תרופות בתפוקה גבוהה ולמחקרים פרמקודינמיים in vivo.
SK-BR-3-Luc שומר על הפנוטיפ המולקולרי המוגבר של HER2 ועל מאפייני הצמיחה של קו SK-BR-3 ההורי. הרפורט של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את תפוקת הניסוי ואת הרגישות למחקרי הדמיה in vivo. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את מצב הגברת ה-HER2 ואת קינטיקת הצמיחה בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם לפני שימוש פרה-קליני בקנה מידה נרחב.
- Tissue
- גרורתי
- Disease
- אדנוקרצינומה של השד
- Metastatic site
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים, צורות אדנוקרצינומה מובחנות גרוע
04Identifiers
- Citation
- SK-BR-3-Luc (מספר קטלוג Cytion 305709)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4Y11
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- סוג דם A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (פיית האש, מותאם לקודון)
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0044
- Mutational profile
- מוטציה: p.Arg175His, הומוזיגוטית
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5A בינוני (מותאם), משקל: 3.0 גרם/ליטר גלוקוז, משקל: גלוטמין יציב, משקל: 2.0 מילימול פירובט נתרן, משקל: 2.2 גרם/ליטר NaHCO₃ (Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 2–4*10^4 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 43 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
