Gå til innholdet
SK-BR-3-Luc
Vev
Metastatisk
Sykdom
Adenokarsinom i bryst
Metastaseområde
Pleuraeffusjon

Dokumenter

SK-BR-3-Luc

Cell line · Produktnummer 305709

SK-BR-3-Luc er et bioluminescerende derivat av den humane brystadenokarsinomcellelinjen SK-BR-3, som er genetisk modifisert for å uttrykke et ildflue-luciferase-reportergen på en stabil måte...

€777.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

SK-BR-3-Luc er et bioluminescerende derivat av den humane brystadenokarsinomcellelinjen SK-BR-3, som er genmodifisert til å uttrykke et reportergen for ildflue-luciferase på en stabil måte. Den opprinnelige SK-BR-3-cellelinjen ble etablert fra en pleural effusjonsmetastase av et brystadenokarsinom hos en 43 år gammel kaukasisk kvinnelig pasient og er preget av HER2 (ERBB2)-genamplifikasjon og -overekspresjon, noe som klassifiserer den som en HER2-positiv brystkreftmodell. SK-BR-3-celler viser epitel-lignende monolagsvekst og brukes i stor utstrekning til å studere biologien bak HER2-drevet brystkreft og til å evaluere HER2-målrettede behandlinger, inkludert trastuzumab, lapatinib, pertuzumab og antistoff-legemiddelkonjugater som trastuzumab-deruxtecan.

Den stabile luciferase-integrasjonen i SK-BR-3-Luc muliggjør følsom, kvantitativ bioluminescensavbildning (BLI) av tumorbelastning i xenotransplantatmodeller hos immunsvekkede verter. Det utsendte luminescenssignalet korrelerer med antall levedyktige tumorceller, noe som muliggjør ikke-invasiv, longitudinell overvåking av tumorinnpodning, vekstkinetikk og terapeutisk respons. SK-BR-3-Luc er spesielt verdifullt for preklinisk evaluering av anti-HER2-midler, ADC-er, bispesifikke antistoffer og kombinasjonsstrategier rettet mot HER2-signalaksen ved brystkreft, samt for legemiddelscreening med høy gjennomstrømning og farmakodynamiske studier in vivo.

SK-BR-3-Luc beholder den etablerte HER2-amplifiserte molekylære fenotypen og vekstegenskapene til den opprinnelige SK-BR-3-linjen. Luciferase-reporteren forbedrer eksperimentell gjennomstrømning og følsomhet for in vivo-avbildningsstudier betydelig. Forskere bør bekrefte luciferaseaktivitet, HER2-amplifikasjonsstatus og vekstkinetikk under sine spesifikke eksperimentelle betingelser før storskala preklinisk bruk.

Vev
Metastatisk
Sykdom
Adenokarsinom i bryst
Metastaseområde
Pleuraeffusjon

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus, danner lite differensiert adenokarsinom

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-BR-3-Luc (Cytion-katalognummer 305709)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
Blodtype A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (ildflue, kodonoptimalisert)
Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0044
Mutasjonsprofil
Mutasjon: p.Arg175His, homozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
McCoys 5A medium (modifisert), vekt: 3,0 g/l glukose, vekt: stabilt glutamin, vekt: 2,0 mM natriumpyruvat, vekt: 2,2 g/l NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 3
Såtetthet
2–4 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
43 år
Etnisitet
Kaukasisk