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SK-BR-3-Luc
Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma da mama
Local da metástase
Derrame pleural

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SK-BR-3-Luc

Cell line · Número do produto 305709

A SK-BR-3-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana SK-BR-3 de adenocarcinoma da mama, geneticamente modificada para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo...

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01Informações gerais

Descrição

A SK-BR-3-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana SK-BR-3 de adenocarcinoma da mama, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental SK-BR-3 foi estabelecida a partir de uma metástase por derrame pleural de um adenocarcinoma da mama numa doente caucasiana de 43 anos e caracteriza-se pela amplificação e sobreexpressão do gene HER2 (ERBB2), o que a classifica como um modelo de cancro da mama HER2-positivo. As células SK-BR-3 apresentam crescimento em monocamada de tipo epitelial e são amplamente utilizadas para estudar a biologia do cancro da mama impulsionado pelo HER2 e para avaliar terapias direcionadas ao HER2, incluindo trastuzumab, lapatinib, pertuzumab e conjugados de anticorpos e fármacos, tais como o trastuzumab-deruxtecan.

A integração estável da luciferase na linha SK-BR-3-Luc permite a obtenção de imagens de bioluminescência (BLI) sensíveis e quantitativas da carga tumoral em modelos de xenoenxertos em hospedeiros imunocomprometidos. O sinal de luminescência emitido está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal não invasiva do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta terapêutica. A SK-BR-3-Luc é particularmente valiosa para a avaliação pré-clínica de agentes anti-HER2, ADCs, anticorpos bispecíficos e estratégias combinadas que têm como alvo o eixo de sinalização HER2 no cancro da mama, bem como para o rastreio de fármacos de alto rendimento e estudos farmacodinâmicos in vivo.

A SK-BR-3-Luc mantém o fenótipo molecular estabelecido de amplificação de HER2 e as características de crescimento da linha parental SK-BR-3. O repórter de luciferase aumenta substancialmente o rendimento experimental e a sensibilidade para estudos de imagiologia in vivo. Os investigadores devem confirmar a atividade da luciferase, o estado de amplificação do HER2 e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização pré-clínica em grande escala.

Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma da mama
Local da metástase
Derrame pleural

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus, forma um adenocarcinoma pouco diferenciado

04Identificadores

Referência
SK-BR-3-Luc (número de catálogo da Cytion 305709)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4Y11

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Tipo sanguíneo A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (pirilampo, com codões otimizados)
Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, Produto de frequência fenotípica: 0.0044
Perfil mutacional
Mutação: p.Arg175His, homozigótica

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
McCoys 5A médio (modificado), p/v: 3,0 g/L de glicose, p/v: glutamina estável, p/v: 2,0 mM de piruvato de sódio, p/v: 2,2 g/L de NaHCO₃ (Cytion 820200a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
2-4*10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
43 anos
Etnia
Caucasiano