Pereiti prie turinio
C17.2
Audinys
Smegenys, smegenėlės
Sinonimai
C17

Dokumentai

C17.2

Cell line · Prekės numeris 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

C17.2 ląstelių linija yra neuronų progenitorių linija, gauta iš pelių smegenėlių, naudojant retrovirusinį onkogeno perkėlimą su paukščių myc genu. Tai viena iš kelių linijų, sukurtų nervų progenitorinių ląstelių diferenciacijos potencialui tirti, ypač daug dėmesio skiriant neuronų ir glijos ląstelių linijoms. C17.2 ląstelės pasižymi pagrindinėmis neuronų progenitorių savybėmis ir tinkamomis sąlygomis gali diferencijuotis tiek į neuronų, tiek į glijos ląsteles, todėl yra vertingos tiriant neuronų vystymąsi, neurogenezę ir gliogenezę.

Vienas iš būdingų C17.2 bruožų yra tai, kad jos gali diferencijuotis į skirtingus nervinių ląstelių tipus, išlaikydamos mitozės potencialą, todėl jas galima ilgai auginti ir atlikti eksperimentines manipuliacijas. Ši linija išreiškia žymenis, būdingus nervų kamieninėms ir progenitorinėms ląstelėms, ir, priklausomai nuo diferencijavimo protokolo, gali būti skatinama išreikšti linijai būdingus žymenis. C17.2 stabilumas ir daugialypiškumas leidžia ją naudoti tiriant veiksnius, darančius įtaką nervinių ląstelių linijiniam pasiskirstymui, taip pat ją galima naudoti nervų atstatymo ir regeneracijos tyrimuose.

Mokslininkai naudoja C17.2 ląsteles tiek in vitro, tiek in vivo, kad suprastų mechanizmus, kontroliuojančius ląstelių likimą centrinėje nervų sistemoje (CNS). Be to, dėl gerai apibūdintų genų integravimo vietų ir pastovios specifinių nervinių žymenų raiškos ši linija yra patikimas modelis neurologinio vystymosi tyrimams ir galimam nervų progenitorinių ląstelių terapiniam vaidmeniui neurodegeneracinių ligų modeliuose tirti.

Audinys
Smegenys, smegenėlės
Sinonimai
  • C17

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Ląstelių tipas
Nervų progenitorių ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
C17.2 (Cytion katalogo numeris 305354)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Išraiška ir jautrumas

Onkogenai
Transformantas: v-Myc

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–4 x 104 ląstelės/cm2
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C57BL/6 x CD-1
Donoro amžius
Naujagimis