Siirry sisältöön
C17.2
Kudos
Aivot, pikkuaivot
Synonyymit
C17

Asiakirjat

C17.2

Cell line · Tuotenumero 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

C17.2-solulinja on hiiren pikkuaivoista peräisin oleva neuraalinen kantasolulinja, joka on saatu käyttämällä retrovirusvälitteistä onkogeeninsiirtoa lintujen myc-geenin kanssa. Se on yksi useista linjoista, jotka on kehitetty hermoston esisolujen erilaistumispotentiaalin tutkimiseen, erityisesti keskittyen neuronien ja gliasolujen sukulinjoihin. C17.2-soluilla on neuraalisten kantasolujen keskeisiä ominaisuuksia, ja ne voivat erilaistua sekä hermosoluiksi että gliasoluiksi sopivissa olosuhteissa, mikä tekee niistä arvokkaita hermoston kehitystä, neurogeneesiä ja gliogeneesiä koskevissa tutkimuksissa.

Yksi C17.2-solujen ominaispiirre on niiden kyky erilaistua eri hermosolutyypeiksi säilyttäen samalla mitoosipotentiaalin, mikä mahdollistaa pitkät viljely- ja koekäsittelyt. Tämä linja ilmentää neuraalisille kantasoluille ja esisoluille tyypillisiä merkkiaineita, ja se voidaan erilaistamisprotokollasta riippuen saada ilmentämään linjakohtaisia merkkiaineita. C17.2:n stabiilius ja monipotenttisuus mahdollistavat sen käytön hermosolujen linjasitoutumiseen vaikuttavien tekijöiden tutkimisessa sekä sen käytön hermosolujen korjaus- ja uudistamistutkimuksissa.

Tutkijat käyttävät C17.2-soluja sekä in vitro- että in vivo -konteksteissa ymmärtääkseen solujen kohtaloa keskushermostossa (CNS) ohjaavia mekanismeja. Lisäksi linjan hyvin karakterisoidut geenien integroitumiskohdat ja erityisten hermostomarkkereiden johdonmukainen ilmentyminen tekevät siitä luotettavan mallin neurologisia kehitystutkimuksia varten ja hermoston esisolujen mahdollisia terapeuttisia rooleja neurodegeneratiivisten sairauksien malleissa tutkittaessa.

Kudos
Aivot, pikkuaivot
Synonyymit
  • C17

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Neuraalinen esisolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
C17.2 (Cytionin luettelonumero 305354)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Ilmentyminen ja alttius

Onkogeenit
Transformantti: v-Myc

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–4 x 104 solua/cm2
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6 x CD-1
Luovuttajan ikä
Vastasyntynyt