Gå til innholdet
C17.2
Vev
Hjerne, lillehjernen
Synonymer
C17

Dokumenter

C17.2

Cell line · Produktnummer 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

C17.2-cellelinjen er en nevral stamcellelinje som er avledet fra lillehjernen hos mus ved hjelp av retroviral onkogenoverføring med det aviære myc-genet. Den er en av flere linjer som er utviklet for å studere differensieringspotensialet til nevrale stamceller, med særlig fokus på nevron- og gliacellelinjer. C17.2-celler har viktige egenskaper som nevrale stamceller og kan differensiere til både nevronale celler og gliaceller under passende forhold, noe som gjør dem verdifulle for studier av nevral utvikling, nevrogenese og gliogenese.

C17.2 kjennetegnes ved at den kan differensiere til forskjellige nevrale celletyper samtidig som den opprettholder mitotisk potensial, noe som gir mulighet for utvidet dyrking og eksperimentell manipulering. Denne linjen uttrykker markører som er karakteristiske for nevrale stam- og progenitorceller, og kan induseres til å uttrykke linjespesifikke markører avhengig av differensieringsprotokollen. Stabiliteten og multipotensen til C17.2 gjør det mulig å bruke den til å undersøke faktorer som påvirker nevrale cellers linjebinding, og den kan også brukes i forskning på reparasjon og regenerering av nervesystemet.

Forskere bruker C17.2-celler i både in vitro- og in vivo-sammenheng for å forstå mekanismer som styrer celleskjebnen i sentralnervesystemet (CNS). I tillegg gjør cellelinjens velkarakteriserte genintegrasjonssteder og konsistente uttrykk av spesifikke nevrale markører den til en pålitelig modell for studier av nevroutvikling og for utforskning av de potensielle terapeutiske rollene til nevrale stamceller i modeller for nevrodegenerative sykdommer.

Vev
Hjerne, lillehjernen
Synonymer
  • C17

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Uspesifisert
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Nevral progenitorcelle

04Identifikatorer

Kildehenvisning
C17.2 (Cytion-katalognummer 305354)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Uttrykk og mottakelighet

Onkogener
Transformant: v-Myc

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 til 4 x 104 celler/cm2
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C57BL/6 x CD-1
Donorens alder
Nyfødt