Preskoči na vsebino
C17.2
Tkivo
Možgani, cerebelum
Sinonimi
C17

Dokumenti

C17.2

Cell line · Številka izdelka 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija C17.2 je linija nevronskih progenitorjev, pridobljena iz mišjega možganovja z retrovirusnim prenosom onkogena z aviarnim genom myc. Je ena od več linij, razvitih za preučevanje diferenciacijskega potenciala nevronskih progenitornih celic, zlasti s poudarkom na linijah nevronskih in glialnih celic. C17.2 celice imajo ključne značilnosti nevronskih progenitorjev in se lahko pod ustreznimi pogoji diferencirajo tako v nevronske kot glialne celice, zaradi česar so dragocene za študije nevralnega razvoja, nevrogeneze in gliogeneze.

Značilnost C17.2 je, da se lahko diferencira v različne tipe nevronskih celic, hkrati pa ohranja mitotični potencial, kar omogoča daljše gojenje in eksperimentalno manipulacijo. Ta linija izraža označevalce, značilne za nevronske matične in progenitorne celice, in jo je mogoče spodbuditi k izražanju označevalcev, značilnih za posamezne linije, odvisno od protokola diferenciacije. Stabilnost in multipotentnost linije C17.2 omogočata njeno uporabo pri proučevanju dejavnikov, ki vplivajo na linijsko zavezanost nevronskih celic, ter njeno uporabo pri raziskavah popravljanja in regeneracije živčevja.

Raziskovalci uporabljajo celice C17.2 tako in vitro kot in vivo za razumevanje mehanizmov, ki nadzorujejo usodo celic v osrednjem živčnem sistemu (CNS). Poleg tega je linija zaradi dobro opisanih mest integracije genov in doslednega izražanja specifičnih nevronskih označevalcev zanesljiv model za nevrorazvojne študije in raziskovanje potencialnih terapevtskih vlog nevronskih progenitornih celic v modelih nevrodegenerativnih bolezni.

Tkivo
Možgani, cerebelum
Sinonimi
  • C17

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Vrsta celice
Nevralna progenitorna celica

04Identifikatorji

Navajanje vira
C17.2 (kataloška številka Cytion 305354)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Izražanje in dovzetnost

Onkogeni
Transformant: v-Myc

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 do 4 x 104 celic/cm2
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C57BL/6 x CD-1
Starost darovalca
Novorojenček