Pāriet uz saturu
C17.2
Audums
Smadzenes, smadzenītes
Sinonīmi
C17

Dokumenti

C17.2

Cell line · Preces numurs 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

C17.2 šūnu līnija ir neironu progenitoru līnija, kas iegūta no peļu smadzenītēm, izmantojot retrovīrusu mediētu onkogēna pārnesi ar putnu myc gēnu. Tā ir viena no vairākām līnijām, kas izstrādātas, lai pētītu nervu progenitoru šūnu diferenciācijas potenciālu, īpaši koncentrējoties uz neironu un gliālo šūnu līnijām. C17.2 šūnām piemīt galvenās nervu progenitoru īpašības, un tās piemērotos apstākļos var diferencēties gan neironu, gan glijas šūnās, tāpēc tās ir vērtīgas neironu attīstības, neirogēzes un gliogēzes pētījumos.

Viena no C17.2 raksturīgajām iezīmēm ir tās potenciāls diferencēties dažādos nervu šūnu tipos, vienlaikus saglabājot mitotisko potenciālu, kas ļauj veikt ilgstošas kultūras un eksperimentālas manipulācijas. Šī līnija izrāda nervu cilmes un progenitoru šūnām raksturīgus marķierus, un atkarībā no diferenciācijas protokola to var inducēt, lai izteiktu līniju specifiskus marķierus. C17.2 stabilitāte un multipotence ļauj to izmantot, lai pētītu faktorus, kas ietekmē nervu šūnu līnijveides veidošanos, kā arī lai to izmantotu nervu atjaunošanas un reģenerācijas pētījumos.

Pētnieki izmanto C17.2 šūnas gan in vitro, gan in vivo apstākļos, lai izprastu mehānismus, kas kontrolē šūnu likteni centrālajā nervu sistēmā (CNS). Turklāt šīs līnijas labi raksturotās gēnu integrācijas vietas un konsekventā specifisku nervu marķieru ekspresija padara to par uzticamu modeli neiroloģiskās attīstības pētījumiem un neironu progenitoru šūnu potenciālās terapeitiskās lomas izpētei neirodeģeneratīvo slimību modeļos.

Audums
Smadzenes, smadzenītes
Sinonīmi
  • C17

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Neironu progenitoru šūnas

04Identifikatori

Atsauce
C17.2 (Cytion kataloga numurs 305354)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Pazīmes un uzņēmība

Onkogēni
Transformants: v-Myc

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 līdz 4 x 104 šūnas/cm2
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6 x CD-1
Donora vecums
Jaundzimušais