Mine otse sisu juurde
C17.2
Kude
Aju, väikeaju
Sünonüümid
C17

Dokumendid

C17.2

Cell line · Toote number 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

C17.2 rakuliin on neuronaalne progenitorliin, mis on saadud hiire väikeajust, kasutades retroviirusega vahendatud onkogeeni ülekannet koos lindude myc-geeniga. See on üks mitmest liinist, mis on välja töötatud neuronaalsete eellaste diferentseerumispotentsiaali uurimiseks, keskendudes eelkõige neuronite ja gliarakkude liinidele. C17.2 rakkudel on neuronaalsete eellaste põhilised omadused ja nad suudavad sobivatel tingimustel diferentseeruda nii neuronaalseteks kui ka gliarakkudeks, mistõttu on nad väärtuslikud neuronaalse arengu, neurogeneesi ja gliogeneesi uuringutes.

C17.2 üks iseloomulikke omadusi on selle võime diferentseeruda erinevateks neuronaalseks rakutüüpideks, säilitades samal ajal mitootilise potentsiaali, mis võimaldab pikemat kasvatamist ja eksperimentaalset manipuleerimist. See liin ekspresseerib neuraalsetele tüvi- ja eelkoosseisurakkudele iseloomulikke markereid ning seda saab diferentseerimisprotokollist sõltuvalt diferentseerimisprotokollist sundida ekspresseerima liinispetsiifilisi markereid. C17.2 stabiilsus ja multipotentsus võimaldavad seda kasutada neuronaalsete rakkude põlvnemist mõjutavate tegurite uurimisel ning samuti neuronaalsete taastamise ja regenereerimise uuringutes.

Teadlased kasutavad C17.2 rakke nii in vitro kui ka in vivo kontekstis, et mõista kesknärvisüsteemi (KNS) rakkude saatust kontrollivaid mehhanisme. Lisaks teevad selle liini hästi iseloomustatud geenide integratsioonikohad ja spetsiifiliste neuraalsete markerite järjepidev ekspressioon usaldusväärseks mudeliks neurodegeneratiivsete uuringute läbiviimiseks ja neurodegeneratiivsete haiguste mudelites neuraalsete eellaste võimalike terapeutiliste rollide uurimiseks.

Kude
Aju, väikeaju
Sünonüümid
  • C17

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Neuraalne eelkäijarakk

04Tunnused

Viide
C17.2 (Cytioni katalooginumber 305354)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Onkogeenid
Transformant: v-Myc

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6 x CD-1
Doonori vanus
Vastsündinu