Prejsť na obsah
C17.2
Tkanivo
Mozog, mozoček
Synonymá
C17

Dokumenty

C17.2

Cell line · Číslo výrobku 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia C17.2 je línia neurálnych progenitorov odvodená z myšieho mozočku pomocou retrovírusového prenosu onkogénu s vtáčím génom myc. Je to jedna z niekoľkých línií vyvinutých na štúdium diferenciačného potenciálu neurálnych progenitorových buniek, najmä so zameraním na línie neurónov a gliových buniek. Bunky C17.2 vykazujú kľúčové vlastnosti neurálnych progenitorov a za vhodných podmienok sa môžu diferencovať na neurónové aj gliové bunky, vďaka čomu sú cenné pre štúdie neurálneho vývoja, neurogenézy a gliogenézy.

Jednou z charakteristických vlastností C17.2 je ich potenciál diferencovať sa na odlišné typy neurónových buniek pri zachovaní mitotického potenciálu, čo umožňuje rozšírenú kultiváciu a experimentálnu manipuláciu. Táto línia exprimuje markery charakteristické pre neurálne kmeňové a progenitorové bunky a v závislosti od diferenciačného protokolu ju možno indukovať na expresiu markerov špecifických pre jednotlivé línie. Stabilita a multipotencia C17.2 umožňujú jej použitie pri skúmaní faktorov ovplyvňujúcich líniovú viazanosť neurónových buniek, ako aj jej použitie pri výskume neurónových opráv a regenerácie.

Výskumníci používajú bunky C17.2 v kontexte in vitro aj in vivo na pochopenie mechanizmov riadiacich osud buniek v centrálnom nervovom systéme (CNS). Okrem toho dobre charakterizované miesta integrácie génov a konzistentná expresia špecifických neurálnych markerov robia z tejto línie spoľahlivý model pre neurodevelopmentálne štúdie a pre skúmanie potenciálnych terapeutických úloh neurálnych progenitorových buniek v modeloch neurodegeneratívnych ochorení.

Tkanivo
Mozog, mozoček
Synonymá
  • C17

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Typ bunky
Nervové progenitorové bunky

04Identifikátory

Citácia
C17.2 (katalógové číslo Cytion 305354)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Prejav a náchylnosť

Onkogény
Transformant: v-Myc

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buniek/cm2
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6 x CD-1
Vek darcu
Novorodenec