Przejdź do treści
C17.2
Chusteczka
Mózg, móżdżek
Synonimy
C17

Dokumenty

C17.2

Cell line · Numer produktu 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa C17.2 jest neuronalną linią progenitorową pochodzącą z móżdżku myszy przy użyciu retrowirusowego transferu onkogenu z ptasim genem myc. Jest to jedna z kilku linii opracowanych w celu badania potencjału różnicowania neuronalnych komórek progenitorowych, ze szczególnym uwzględnieniem linii neuronów i komórek glejowych. Komórki C17.2 wykazują kluczowe cechy progenitorów neuronalnych i mogą różnicować się zarówno w komórki neuronalne, jak i glejowe w odpowiednich warunkach, co czyni je cennymi w badaniach nad rozwojem neuronów, neurogenezą i glejogenezą.

Jedną z cech charakterystycznych linii C17.2 jest jej potencjał do różnicowania się w różne typy komórek neuronalnych przy jednoczesnym zachowaniu potencjału mitotycznego, co pozwala na rozszerzoną hodowlę i manipulacje eksperymentalne. Linia ta wyraża markery charakterystyczne dla neuronalnych komórek macierzystych i progenitorowych i może być indukowana do wyrażania markerów specyficznych dla linii w zależności od protokołu różnicowania. Stabilność i multipotencjalność C17.2 umożliwiają jej wykorzystanie do badania czynników wpływających na zaangażowanie linii w komórkach nerwowych, a także jej zastosowanie w badaniach nad naprawą i regeneracją neuronów.

Naukowcy wykorzystują komórki C17.2 zarówno w kontekście in vitro, jak i in vivo, aby zrozumieć mechanizmy kontrolujące losy komórek w ośrodkowym układzie nerwowym (OUN). Ponadto, dobrze scharakteryzowane miejsca integracji genów i spójna ekspresja określonych markerów neuronalnych sprawiają, że linia ta jest niezawodnym modelem do badań neurorozwojowych i do badania potencjalnej roli terapeutycznej neuronalnych komórek progenitorowych w modelach chorób neurodegeneracyjnych.

Chusteczka
Mózg, móżdżek
Synonimy
  • C17

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Neuronalna komórka progenitorowa

04Identyfikatory

Źródło
C17.2 (numer katalogowy Cytion 305354)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Ekspresja i podatność

Onkogeny
Transformant: v-Myc

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
2 do 4 x 104 komórek/cm2
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6 x CD-1
Wiek dawcy
Noworodek