Přejít na obsah
C17.2
Tkáň
Mozek, mozeček
Synonyma
C17

Dokumenty

C17.2

Cell line · Číslo výrobku 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie C17.2 je linie neurálních progenitorů odvozená z myšího mozečku pomocí retrovirálního přenosu onkogenu s ptačím genem myc. Jedná se o jednu z několika linií vyvinutých ke studiu diferenciačního potenciálu nervových progenitorových buněk, zejména se zaměřením na linie neuronů a gliových buněk. Buňky C17.2 vykazují klíčové vlastnosti neurálních progenitorů a za vhodných podmínek se mohou diferencovat jak v neuronální, tak v gliové buňky, což je činí cennými pro studium vývoje neuronů, neurogeneze a gliogeneze.

Jedním z charakteristických rysů buněk C17.2 je jejich schopnost diferencovat se do různých typů nervových buněk při zachování mitotického potenciálu, což umožňuje rozšířenou kultivaci a experimentální manipulaci. Tato linie exprimuje markery charakteristické pro nervové kmenové a progenitorové buňky a v závislosti na diferenciačním protokolu může být indukována k expresi markerů specifických pro jednotlivé linie. Stabilita a multipotence linie C17.2 umožňují její použití při zkoumání faktorů ovlivňujících vývojovou linii nervových buněk a také její využití ve výzkumu nervových oprav a regenerace.

Výzkumníci využívají buňky C17.2 v kontextu in vitro i in vivo k pochopení mechanismů řídících osud buněk v centrálním nervovém systému (CNS). Kromě toho jsou díky dobře charakterizovaným místům genové integrace a konzistentní expresi specifických nervových markerů spolehlivým modelem pro neurovývojové studie a pro zkoumání potenciální terapeutické role nervových progenitorových buněk v modelech neurodegenerativních onemocnění.

Tkáň
Mozek, mozeček
Synonyma
  • C17

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Nervové progenitorové buňky

04Identifikátory

Citace
C17.2 (katalogové číslo Cytion 305354)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Exprese a náchylnost

Onkogeny
Transformant: v-Myc

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buněk/cm2
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C57BL/6 x CD-1
Věk dárce
Novorozenci