Tartalomra ugrás
C17.2
Szövet
Agy, kisagy
Szinonimák
C17

Dokumentumok

C17.2

Cell line · Termékszám 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A C17.2 sejtvonal egy neurális progenitor vonal, amely az egér kisagyból származik retrovírus közvetítésű onkogén-transzferrel, a madár myc génnel. Ez egyike a neurális progenitor sejtek differenciálódási potenciáljának tanulmányozására kifejlesztett számos vonalnak, különös tekintettel a neuron és gliasejt vonalra. A C17.2 sejtek a neurális progenitorok kulcsfontosságú jellemzőit mutatják, és megfelelő körülmények között képesek mind neuronális, mind gliasejtekké differenciálódni, ami értékessé teszi őket az idegrendszeri fejlődés, a neurogenezis és a gliogenezis tanulmányozásában.

A C17.2 egyik meghatározó jellemzője, hogy képes különböző neurális sejttípusokká differenciálódni, miközben megőrzi mitotikus potenciálját, ami lehetővé teszi a kiterjedt tenyésztést és a kísérleti manipulációt. Ez a vonal kifejezi a neurális ős- és progenitor sejtekre jellemző markereket, és a differenciálási protokolltól függően indukálható a vonal-specifikus markerek kifejezésére. A C17.2 stabilitása és multipotenciája lehetővé teszi a felhasználását az idegsejtek vonalhoz kötődését befolyásoló tényezők vizsgálatára, valamint az idegrendszeri javítás és regeneráció kutatásában való alkalmazását.

A kutatók a C17.2 sejteket in vitro és in vivo kontextusban egyaránt alkalmazzák a központi idegrendszerben (CNS) a sejtsorsot irányító mechanizmusok megértésére. Ezen túlmenően a vonal jól jellemzett génintegrációs helyei és a specifikus neurális markerek következetes expressziója megbízható modellé teszi a vonalat az idegfejlődési vizsgálatokhoz és a neurális progenitor sejtek lehetséges terápiás szerepének feltárásához neurodegeneratív betegségmodellekben.

Szövet
Agy, kisagy
Szinonimák
  • C17

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Sejttípus
Idegi progenitor sejt

04Azonosítók

Hivatkozás
C17.2 (Cytion katalógusszám: 305354)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Kifejeződés és fogékonyság

Onkogének
Transzformáns: v-Myc

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2–4 x 104 sejt/cm2
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6 x CD-1
Az adományozó életkora
Újszülött