Μετάβαση στο περιεχόμενο
C17.2
Ιστός
Εγκέφαλος, παρεγκεφαλίδα
Συνώνυμα
C17

Έγγραφα

C17.2

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά C17.2 είναι μια νευρική προγονική σειρά που προέρχεται από την παρεγκεφαλίδα του ποντικού με τη χρήση ρετροϊικής μεταφοράς ογκογονιδίων με το γονίδιο myc των πτηνών. Είναι μία από τις διάφορες σειρές που αναπτύχθηκαν για τη μελέτη του δυναμικού διαφοροποίησης των νευρικών προγονικών κυττάρων, με ιδιαίτερη έμφαση στις σειρές νευρώνων και γλοιακών κυττάρων. Τα κύτταρα C17.2 παρουσιάζουν βασικά χαρακτηριστικά των νευρικών προγονικών κυττάρων και μπορούν να διαφοροποιηθούν τόσο σε νευρωνικά όσο και σε γλοιακά κύτταρα υπό κατάλληλες συνθήκες, γεγονός που τα καθιστά πολύτιμα για μελέτες σχετικά με τη νευρική ανάπτυξη, τη νευρογένεση και τη γλοιογένεση.

Ένα καθοριστικό χαρακτηριστικό του C17.2 είναι η δυνατότητά του να διαφοροποιείται σε διακριτούς τύπους νευρικών κυττάρων διατηρώντας παράλληλα το μιτωτικό δυναμικό, επιτρέποντας την εκτεταμένη καλλιέργεια και τον πειραματικό χειρισμό. Αυτή η γραμμή εκφράζει δείκτες που χαρακτηρίζουν τα νευρικά βλαστικά και προγονικά κύτταρα και μπορεί να επαχθεί να εκφράσει δείκτες που σχετίζονται με συγκεκριμένη γενεαλογική γραμμή ανάλογα με το πρωτόκολλο διαφοροποίησης. Η σταθερότητα και η πολλαπλασιαστικότητα της C17.2 επιτρέπουν τη χρήση της για την εξέταση παραγόντων που επηρεάζουν τη δέσμευση της γενεαλογικής γραμμής στα νευρικά κύτταρα, καθώς και την εφαρμογή της στην έρευνα για τη νευρική επιδιόρθωση και αναγέννηση.

Οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα C17.2 τόσο σε in vitro όσο και σε in vivo περιβάλλοντα για να κατανοήσουν τους μηχανισμούς που ελέγχουν την κυτταρική μοίρα στο κεντρικό νευρικό σύστημα (ΚΝΣ). Επιπλέον, οι καλά χαρακτηρισμένες θέσεις γονιδιακής ενσωμάτωσης της σειράς και η συνεπής έκφραση συγκεκριμένων νευρικών δεικτών την καθιστούν αξιόπιστο μοντέλο για μελέτες νευροαναπτυξιακής φύσης και για τη διερεύνηση των πιθανών θεραπευτικών ρόλων των νευρικών προγονικών κυττάρων σε μοντέλα νευροεκφυλιστικών ασθενειών.

Ιστός
Εγκέφαλος, παρεγκεφαλίδα
Συνώνυμα
  • C17

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Τύπος κυττάρου
Νευρικό προγονικό κύτταρο

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
C17.2 (αριθμός καταλόγου Cytion 305354)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_4511

05Έκφραση και ευαισθησία

Ογκογονίδια
Μετασχηματιστής: v-Myc

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
2 έως 4 x 104 κύτταρα/cm2
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C57BL/6 x CD-1
Ηλικία δωρητή
Νεογέννητο