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C17.2
Tecido
Cérebro, cerebelo
Sinónimos
C17

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C17.2

Cell line · Número do produto 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular C17.2 é uma linha progenitora neural derivada do cerebelo do rato, utilizando a transferência de oncogene mediada por retroviral com o gene myc aviário. Trata-se de uma das várias linhas desenvolvidas para estudar o potencial de diferenciação das células progenitoras neurais, com especial incidência nas linhagens de células neuronais e gliais. As células C17.2 apresentam caraterísticas-chave dos progenitores neurais e podem diferenciar-se em células neuronais e gliais em condições adequadas, o que as torna valiosas para estudos sobre o desenvolvimento neural, a neurogénese e a gliogénese.

Uma caraterística que define a C17.2 é o seu potencial para se diferenciar em tipos distintos de células neurais, mantendo o potencial mitótico, o que permite uma cultura alargada e a manipulação experimental. Esta linha expressa marcadores caraterísticos de células estaminais e progenitoras neurais e pode ser induzida a expressar marcadores específicos de linhagens, dependendo do protocolo de diferenciação. A estabilidade e a multipotência da C17.2 permitem a sua utilização na análise de factores que afectam o compromisso de linhagem em células neurais, bem como a sua aplicação na investigação da reparação e regeneração neurais.

Os investigadores utilizam as células C17.2 em contextos in vitro e in vivo para compreender os mecanismos que controlam o destino das células no sistema nervoso central (SNC). Além disso, os locais de integração de genes bem caracterizados da linha e a expressão consistente de marcadores neurais específicos fazem dela um modelo fiável para estudos de neurodesenvolvimento e para explorar os potenciais papéis terapêuticos das células progenitoras neurais em modelos de doenças neurodegenerativas.

Tecido
Cérebro, cerebelo
Sinónimos
  • C17

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Célula progenitora neural

04Identificadores

Referência
C17.2 (número de catálogo Cytion 305354)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Expressão e suscetibilidade

Oncogenes
Transformante: v-Myc

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 a 4 x 104 células/cm2
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6 x CD-1
Idade do dador
Recém-nascido