Pāriet uz saturu
MOLM-16
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Akūta mieloīdā leikēmija pieaugušajiem
Sinonīmi
MOLM16

Dokumenti

MOLM-16

Cell line · Preces numurs 305831

MOLM-16 is a human leukemia cell line derived from the peripheral blood of an adult woman with minimally differentiated acute myeloid leukemia (AML-M0) at...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MOLM-16 ir cilvēka leikēmijas šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušas sievietes perifērās asins, kurai bija recidīvs ar minimāli diferencētu akūtu mieloīdo leikēmiju (AML-M0). Šai līnijai piemīt raksturīgs imūnfenotips, kas atbilst mieloīdo/dabisko slepkavju (NK) prekursoru leikēmijai, un tā ekspresē CD7, CD13, CD33, CD34 un CD56. Turklāt tai piemīt megakariocītu diferenciācijas pazīmes, ko apliecina tādu marķieru ekspresija kā CD41, CD61, CD36, CD62P, CD110, CD151, trombospondīns, von Willebranda faktors (vWF) un fibrinogēns. Trombocītu peroksidāzes klātbūtne kodola apvalkā, kas novērota ar elektronu mikroskopiju, vēl vairāk apstiprina tās megakarioblastiskās ciltskoka īpašības.

MOLM-16 parāda citokīnu atkarīgu augšanu un reaģē uz virkni hematopoētisko augšanas faktoru, tostarp eritropoetīnu (EPO), granulocītu-makrofāgu koloniju stimulējošo faktoru (GM-CSF), interleikīnu-3 (IL-3), PIXY321 un trombopoetīnu (TPO). Citogenētiskā analīze atklāj sarežģītas kariotipiskas anomālijas, piemēram, t(6;8)(q21;q24.3) un t(9;18)(q13;q21), kas norāda uz genomu nestabilitāti, kas ir raksturīga akūtai leikēmijai. Šajā šūnu līnijā nav T- un B-limfoīdo marķieru ekspresijas, kas atbilst tās mieloīdo/NK prekursoru profilam, un tā ir negatīva attiecībā uz mieloperoxidāzes (MPO) aktivitāti, kas ir AML-M0 raksturīga pazīme. Pateicoties unikālajai mieloīdo, NK un megakariocītu pazīmju kombinācijai, MOLM-16 kalpo kā vērtīgs in vitro modelis, lai pētītu minimāli diferencētas AML bioloģiju, megakariopoēzi un leikēmijas diferenciācijas ceļus.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Akūta mieloīdā leikēmija pieaugušajiem
Sinonīmi
  • MOLM16

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Epitēlijveida
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 50–80 stundas

04Identifikatori

Atsauce
MOLM-16 (Cytion kataloga numurs 305831)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2120

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TP53, vienkārša, p.Val173Met (c.517G>A), heterozigota (Cosmic-CLP=1330948), TP53, vienkārša, p.Cys238Ser (c.713G>C), heterozigota (Cosmic-CLP=1330948)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
77 gadi
Etniskā piederība
Japāņu