- Tissue
- Mama
- Disease
- Carcinoma ductal invasivo
- Metastatic site
- Derrame pleural
- Synonyms
- T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D
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T47D
Cell line · Product number 300353
The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...
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01General information
- Description
La línea celular T47D, derivada del derrame pleural de un carcinoma ductal infiltrante de mama, se ha convertido en un recurso fundamental para la investigación del cáncer de mama. Las células T47D son únicas en el ámbito de la investigación del cáncer por su perfil de expresión hormonal, en particular por expresar receptores para el 17-beta-estradiol, otros esteroides y la calcitonina. Además, las células T47D expresan el oncogén WNT7B.
Las células T47D se distinguen porque la expresión de su receptor de progesterona no está regulada por el estradiol, a pesar de la abundancia de esta hormona en las células, lo que las diferencia de las células MCF7, ampliamente reconocidas por su positividad al receptor de estrógeno y que se utilizan con frecuencia para explorar el papel del estrógeno en la proliferación tumoral y la respuesta a las terapias.
La utilidad de la línea celular T47D se extiende a la formación de xenoinjertos en ratones inmunodeficientes, los cuales son valiosos para la prueba de fármacos, la observación de cambios en el estado de los receptores y el estudio de la angiogénesis.
Además, la línea celular T-47D es un recurso para los estudios de genes oncológicos, ya que brinda información sobre el panorama genómico y proteómico que impulsa el cáncer de mama. Al facilitar una comprensión más profunda de los perfiles proteómicos y transcriptómicos del cáncer de mama, la línea celular T47D ayuda a identificar nuevos fenotipos de células de cáncer de mama y a desarrollar terapias dirigidas.
Las células T47D han sido fundamentales para estudiar los efectos de hormonas como la progesterona en el cáncer de mama, ofreciendo información sobre la regulación transcripcional, la resistencia a los medicamentos y el desarrollo de modelos de xenoinjertos para pruebas terapéuticas.
- Tissue
- Mama
- Disease
- Carcinoma ductal invasivo
- Metastatic site
- Derrame pleural
- Synonyms
- T-47-D
- T47-D
- T47D:A
- T47D
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Sí, en ratones desnudos
- Karyotype
- Modo = 66, cromosomas dicéntricos y submetacéntricos extralargos
04Identifiers
- Citation
- T47D (número de catálogo de Cytion 300353)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0553
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Estradiol, esteroides, calcitonina, andrógenos, progesterona, glucocorticoides, prolactina, estrógenos
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
- Oncogenes
- Wnt3+, Wnt7h+, Wnt7b+
- Mutational profile
- Mutación del TP53
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS y 10 microgramos/ml de insulina HREC
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- 1 x 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 54 años
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes