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T47D
Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Documentos

T47D

Cell line · Número do produto 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular T47D, proveniente do derrame pleural de um carcinoma ductal infiltrante da mama, tornou-se um recurso fundamental na investigação do cancro da mama. As células T-47D são únicas no domínio da investigação sobre o cancro devido ao seu perfil de expressão hormonal, particularmente por transportarem receptores para 17 beta estradiol, vários outros esteróides e calcitonina. Além disso, as células T47D expressam o oncogene WNT7B.

As células T47D destacam-se pelo facto de a expressão do recetor de progesterona não ser regulada pelo estradiol, apesar da abundância da hormona nas células, o que as distingue das células MCF7, que são amplamente reconhecidas pela sua positividade do recetor de estrogénio e são frequentemente utilizadas para explorar o papel do estrogénio na proliferação de tumores e na resposta a terapias.

A utilidade da linha de células T47D estende-se à formação de xenoenxertos em ratinhos imunodeficientes, que são valiosos para testar medicamentos, observar alterações do estado dos receptores e estudar a angiogénese.

Além disso, a linha de células T-47D é um recurso para o estudo dos genes do cancro, fornecendo informações sobre a paisagem genómica e proteómica que impulsiona o cancro da mama. Ao facilitar uma compreensão mais profunda dos perfis proteómicos e transcriptómicos do cancro da mama, a linha celular de cancro da mama t47d contribui para a identificação de novos fenótipos celulares do cancro da mama e para o desenvolvimento de terapias orientadas.

As células T47D têm sido fundamentais para o estudo dos efeitos de hormonas como a progesterona no cancro da mama, oferecendo informações sobre a regulação transcricional, a resistência aos medicamentos e o desenvolvimento de modelos de xenoenxertos para testes terapêuticos.

Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus
Cariótipo
Modo = 66, cromossomas dicêntricos e submetacêntricos extra longos

04Identificadores

Referência
T47D (número de catálogo Cytion 300353)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Estradiol, esteróides, calcitonina, androgénio, progesterona, glucocorticoide, prolactina, estrogénio
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Oncogenes
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Perfil mutacional
TP53 mut

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 10 microgramas/ml de insulina HREC
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
54 anos
Etnia
Caucasiano