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T47D
Pañuelo de papel
Pecho
Enfermedad
Carcinoma ductal invasivo
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Documentos

T47D

Cell line · Número de producto 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

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01Información general

Descripción

La línea celular T47D, procedente del derrame pleural de un carcinoma ductal infiltrante de mama, se ha convertido en un recurso fundamental en la investigación del cáncer de mama. Las células T-47D son únicas en el ámbito de la investigación del cáncer por su perfil de expresión hormonal, en particular por portar receptores para 17 beta estradiol, otros esteroides y calcitonina. Además, las células T47D expresan el oncogén WNT7B.

Las células T47D destacan porque la expresión de su receptor de progesterona no está regulada por el estradiol, a pesar de la abundancia de la hormona en las células, lo que las diferencia de las células MCF7, ampliamente reconocidas por su positividad para el receptor de estrógenos y utilizadas con frecuencia para explorar el papel de los estrógenos en la proliferación tumoral y la respuesta a las terapias.

La utilidad de la línea celular T-47D se extiende a la formación de xenoinjertos en ratones inmunodeficientes, que son valiosos para el ensayo de fármacos, la observación de cambios en el estado de los receptores y el estudio de la angiogénesis.

Además, la línea celular T-47D es un recurso para el estudio de los genes del cáncer, ya que proporciona información sobre el panorama genómico y proteómico del cáncer de mama. Al facilitar una comprensión más profunda de los perfiles proteómicos y transcriptómicos del cáncer de mama, la línea celular de cáncer de mama t47d contribuye a la identificación de nuevos fenotipos celulares de cáncer de mama y al desarrollo de terapias dirigidas.

Las células T47D han sido fundamentales para estudiar los efectos de hormonas como la progesterona en el cáncer de mama, ofreciendo información sobre la regulación transcripcional, la resistencia a los fármacos y el desarrollo de modelos de xenoinjerto para ensayos terapéuticos.

Pañuelo de papel
Pecho
Enfermedad
Carcinoma ductal invasivo
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos
Cariotipo
Modo = 66, cromosomas dicéntricos y submetacéntricos extralargos

04Identificadores

Referencia
T47D (número de catálogo 300353 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Estradiol, esteroides, calcitonina, andrógenos, progesterona, glucocorticoides, prolactina, estrógenos
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Oncogenes
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Perfil mutacional
TP53 mut

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS, 10 microgramos/ml de insulina HREC
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
54 años
Origen étnico
Caucásico