Preskoči na vsebino
T47D
Tkivo
Prsi
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Dokumenti

T47D

Cell line · Številka izdelka 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija T47D, ki izvira iz plevralnega izliva infiltrirajočega duktalnega karcinoma dojke, je postala pomemben vir pri raziskavah raka dojke. Celice T-47D so edinstvene na področju raziskav raka zaradi svojega profila hormonskega izražanja, zlasti ker imajo receptorje za estradiol 17 beta, različne druge steroide in kalcitonin. Poleg tega celice T47D izražajo onkogen WNT7B.

Celice T47D se razlikujejo od celic MCF7, ki so splošno znane po svoji pozitivnosti estrogenskih receptorjev in se pogosto uporabljajo za raziskovanje vloge estrogena pri proliferaciji tumorjev in odzivu na terapije, saj njihovega izražanja progesteronskih receptorjev ne uravnava estradiol, čeprav je tega hormona v celicah veliko.

Uporabnost celične linije T47D se razteza na oblikovanje ksenograftov v imunsko pomanjkljivih miših, ki so dragoceni za testiranje zdravil, opazovanje sprememb stanja receptorjev in preučevanje angiogeneze.

Poleg tega je celična linija T-47D vir za študije rakavih genov, ki omogočajo vpogled v genomsko in proteomsko pokrajino, ki je gonilna sila raka dojke. Celična linija t47d za raka dojk omogoča boljše razumevanje proteomskih in transkriptomskih profilov raka dojk, zato pomaga pri prepoznavanju novih fenotipov celic raka dojk in razvoju ciljnih terapij.

Celice T47D so bile ključne pri preučevanju učinkov hormonov, kot je progesteron, na raka dojk, saj omogočajo vpogled v regulacijo transkripcije, odpornost na zdravila in razvoj ksenografskih modelov za terapevtsko testiranje.

Tkivo
Prsi
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših
Kariotip
Način = 66, dicentrični in zelo dolgi submetacentrični kromosomi

04Identifikatorji

Navajanje vira
T47D (kataloška številka Cytion 300353)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Estradiol, steroidi, kalcitonin, androgen, progesteron, glukokortikoid, prolaktin, estrogen
Izoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Onkogeni
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Profil mutacij
TP53 mut

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 10 mikrogramov/ml insulina HREC
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
54 let
Etnična pripadnost
Kavkaški