Siirry sisältöön
T47D
Kudos
Rinta
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Asiakirjat

T47D

Cell line · Tuotenumero 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

T47D-solulinjasta, joka on peräisin infiltroivan duktaalisen rintasyövän pleuraeritteestä, on tullut tärkeä resurssi rintasyöpätutkimuksessa. T-47D-solut ovat syöpätutkimuksessa ainutlaatuisia hormonaalisen ilmentymisprofiilinsa vuoksi, erityisesti koska ne kantavat 17-beeta-estradioli-, useiden muiden steroidien ja kalsitoniinin reseptoreita. Lisäksi T47D-solut ilmentävät WNT7B-onkogeeniä.

T47D-solujen erityispiirteenä on, että estradioli ei säädellä niiden progesteronireseptorin ilmentymistä, vaikka hormonia on soluissa runsaasti, mikä erottaa ne MCF7-soluista, jotka ovat laajalti tunnettuja estrogeenireseptoripositiivisuudestaan ja joita käytetään usein estrogeenin roolin tutkimiseen kasvainten lisääntymisessä ja vasteessa hoitoihin.

T47D-solulinjan hyödyllisyys ulottuu myös ksenotransplantaattien muodostamiseen immuunipuutteisissa hiirissä, jotka ovat arvokkaita lääkkeiden testauksessa, reseptoristatuksen muutosten havainnoinnissa ja angiogeneesin tutkimisessa.

Lisäksi T-47D-solulinja on voimavara syöpägeenitutkimuksille, jotka tarjoavat tietoa rintasyöpää ohjaavasta genomi- ja proteomimaisemasta. Koska t47d-rintasyöpäsolulinja helpottaa rintasyövän proteomi- ja transkriptomiprofiilien syvempää ymmärtämistä, se auttaa uusien rintasyöpäsolujen fenotyyppien tunnistamisessa ja kohdennettujen hoitojen kehittämisessä.

T47D-solut ovat olleet keskeisessä asemassa tutkittaessa progesteronin kaltaisten hormonien vaikutuksia rintasyöpään, ja ne ovat antaneet tietoa transkriptionaalisesta säätelystä, lääkeresistenssistä ja ksenograft-mallien kehittämisestä terapeuttista testausta varten.

Kudos
Rinta
Sairaus
Invasiivinen duktaalikarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä
Karyotyyppi
Mode = 66, diksentriset ja erittäin pitkät submetasentriset kromosomit

04Tunnisteet

Lähdeviite
T47D (Cytionin luettelonumero 300353)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Estradioli, steroidit, kalsitoniini, androgeeni, progesteroni, glukokortikoidi, prolaktiini, estrogeeni
Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Onkogeenit
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b +, wnt7b+
Mutaatioprofiili
TP53 mut

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisätään väliaineeseen 10 % FBS, 10 mikrogrammaa/ml HREC-insuliinia
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
54 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen