Gå til innholdet
T47D
Vev
Bryst
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Dokumenter

T47D

Cell line · Produktnummer 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

T47D-cellelinjen, som stammer fra pleuraeffusjon fra et infiltrerende duktalt brystkarsinom, har blitt en viktig ressurs i brystkreftforskningen. T47D-cellene er unike i kreftforskningen på grunn av sin hormonelle uttrykksprofil, særlig fordi de bærer reseptorer for 17-beta-østradiol, ulike andre steroider og kalsitonin. I tillegg uttrykker T47D-cellene onkogenet WNT7B.

T47D-cellene skiller seg fra MCF7-cellene, som er kjent for sin østrogenreseptorpositivitet og ofte brukes til å undersøke østrogenets rolle i tumorproliferasjon og respons på behandling.

T47D-cellelinjen kan også brukes til å danne xenotransplantater i immundefekte mus, noe som er verdifullt når man skal teste ut legemidler, observere endringer i reseptorstatus og studere angiogenese.

T-47D-cellelinjen er dessuten en ressurs for studier av kreftgener, noe som gir innsikt i det genomiske og proteomiske landskapet som driver brystkreft. Ved å bidra til en dypere forståelse av de proteomiske og transkriptomiske profilene til brystkreft, bidrar T47D-cellelinjen til identifisering av nye fenotyper av brystkreftceller og utvikling av målrettede terapier.

T47D-celler har vært avgjørende for å studere effekten av hormoner som progesteron på brystkreft, og har gitt innsikt i transkripsjonsregulering, legemiddelresistens og utvikling av xenotransplantasjonsmodeller for utprøving av behandling.

Vev
Bryst
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
Karyotype
Modus = 66, diksentriske og ekstra lange submetasentriske kromosomer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
T47D (Cytion-katalognummer 300353)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Østradiol, steroider, kalsitonin, androgen, progesteron, glukokortikoid, prolaktin, østrogen
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Onkogener
Wnt3+, wnt7h+, wnt7b+, wnt7b
Mutasjonsprofil
TP53 mut

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS, 10 mikrogram/ml HREC-insulin
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
54 år
Etnisitet
Kaukasisk