Pāriet uz saturu
T47D
Audums
Krūtis
Slimība
Invazīva duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Dokumenti

T47D

Cell line · Preces numurs 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

T47D šūnu līnija, kas iegūta no krūts infiltrējošas duktālās karcinomas pleiras izplūdes, ir kļuvusi par būtisku resursu krūts vēža pētniecībā. T-47D šūnas ir unikālas vēža izpētes jomā, jo tām ir unikāls hormonālās ekspresijas profils, jo īpaši 17 beta estradiola, dažādu citu steroīdu un kalcitonīna receptori. Turklāt T47D šūnas ekspresē WNT7B onkogēnu.

T47D šūnas izceļas ar to, ka to progesterona receptoru ekspresiju neregulē estradiols, neraugoties uz to, ka šūnās šī hormona ir daudz, tādējādi tās atšķiras no MCF7 šūnām, kuras ir plaši pazīstamas ar to estrogēna receptoru pozitīvo raksturu un kuras bieži izmanto, lai pētītu estrogēna lomu audzēju proliferācijā un reakcijā uz terapiju.

T47D šūnu līnija ir noderīga arī, veidojot ksenogrāfijas imūndeficītām pelēm, kas ir vērtīgas zāļu testēšanai, receptoru statusa izmaiņu novērošanai un angiogēzes izpētei.

Turklāt T-47D šūnu līnija ir resurss vēža gēnu izpētei, sniedzot ieskatu par krūts vēzi noteicošo genomu un proteomu ainavu. Veicinot padziļinātu izpratni par krūts vēža proteomiskajiem un transkriptomiskajiem profiliem, t47d krūts vēža šūnu līnija palīdz identificēt jaunus krūts vēža šūnu fenotipus un izstrādāt mērķterapijas.

T47D šūnas ir bijušas noderīgas, pētot hormonu, piemēram, progesterona, ietekmi uz krūts vēzi, sniedzot ieskatu par transkripcijas regulāciju, rezistenci pret zālēm un izstrādājot ksenogrāfta modeļus terapeitiskiem testiem.

Audums
Krūtis
Slimība
Invazīva duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Kariotips
Mode = 66, dicentriskas un īpaši garas submetacentriskas hromosomas

04Identifikatori

Atsauce
T47D (Cytion kataloga numurs 300353)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Estradiols, steroīdi, kalcitonīns, androgēns, progesterons, glikokortikoīds, prolaktīns, estrogēns
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Onkogēni
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Mutāciju profils
TP53 mutācija

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 10 mikrogramiem/ml HREC insulīna
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
54 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis