- Audums
- Krūtis
- Slimība
- Invazīva duktālā karcinoma
- Metastāžu vieta
- Pleiras izsvīdums
- Sinonīmi
- T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D
Dokumenti
T47D
Cell line · Preces numurs 300353
The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...
Pielāgošana / Ieteikumi
- T47DCell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
T47D šūnu līnija, kas iegūta no krūts infiltrējošas duktālās karcinomas pleiras izplūdes, ir kļuvusi par būtisku resursu krūts vēža pētniecībā. T-47D šūnas ir unikālas vēža izpētes jomā, jo tām ir unikāls hormonālās ekspresijas profils, jo īpaši 17 beta estradiola, dažādu citu steroīdu un kalcitonīna receptori. Turklāt T47D šūnas ekspresē WNT7B onkogēnu.
T47D šūnas izceļas ar to, ka to progesterona receptoru ekspresiju neregulē estradiols, neraugoties uz to, ka šūnās šī hormona ir daudz, tādējādi tās atšķiras no MCF7 šūnām, kuras ir plaši pazīstamas ar to estrogēna receptoru pozitīvo raksturu un kuras bieži izmanto, lai pētītu estrogēna lomu audzēju proliferācijā un reakcijā uz terapiju.
T47D šūnu līnija ir noderīga arī, veidojot ksenogrāfijas imūndeficītām pelēm, kas ir vērtīgas zāļu testēšanai, receptoru statusa izmaiņu novērošanai un angiogēzes izpētei.
Turklāt T-47D šūnu līnija ir resurss vēža gēnu izpētei, sniedzot ieskatu par krūts vēzi noteicošo genomu un proteomu ainavu. Veicinot padziļinātu izpratni par krūts vēža proteomiskajiem un transkriptomiskajiem profiliem, t47d krūts vēža šūnu līnija palīdz identificēt jaunus krūts vēža šūnu fenotipus un izstrādāt mērķterapijas.
T47D šūnas ir bijušas noderīgas, pētot hormonu, piemēram, progesterona, ietekmi uz krūts vēzi, sniedzot ieskatu par transkripcijas regulāciju, rezistenci pret zālēm un izstrādājot ksenogrāfta modeļus terapeitiskiem testiem.
- Audums
- Krūtis
- Slimība
- Invazīva duktālā karcinoma
- Metastāžu vieta
- Pleiras izsvīdums
- Sinonīmi
- T-47-D
- T47-D
- T47D:A
- T47D
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Tumorogēns
- Jā, kailām pelēm
- Kariotips
- Mode = 66, dicentriskas un īpaši garas submetacentriskas hromosomas
04Identifikatori
- Atsauce
- T47D (Cytion kataloga numurs 300353)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0553
05Pazīmes un uzņēmība
- Ekspresētie receptori
- Estradiols, steroīdi, kalcitonīns, androgēns, progesterons, glikokortikoīds, prolaktīns, estrogēns
- Izoenzīmi
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
- Onkogēni
- Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
- Mutāciju profils
- TP53 mutācija
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildiniet barotni ar 10% FBS, 10 mikrogramiem/ml HREC insulīna
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 x 104 šūnas/cm2
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 54 gadi
- Etniskā piederība
- Kaukāzietis
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā