Mine otse sisu juurde
T47D
Kude
Rind
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Dokumendid

T47D

Cell line · Toote number 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

T47D rakuliinist, mis pärineb rinnavähi infiltreeruva duktaalse kartsinoomi pleuraefusioonist, on saanud kriitiline ressurss rinnavähi uurimisel. T-47D rakud on vähiuuringutes ainulaadsed oma hormonaalse ekspressiooniprofiili poolest, eelkõige 17-beeta-östradiooli, mitmesuguste teiste steroidide ja kaltsitoniini retseptorite poolest. Lisaks sellele ekspresseerivad T47D rakud WNT7B onkogeeni.

T47D rakud paistavad silma selle poolest, et nende progesterooniretseptori ekspressiooni ei reguleeri östradiool, vaatamata hormooni rohkusele rakkudes, mis eristab neid MCF7 rakkudest, mis on laialdaselt tuntud oma östrogeeni retseptori positiivsuse poolest ja mida kasutatakse sageli östrogeeni rolli uurimiseks kasvaja proliferatsioonis ja ravivastuses.

T47D rakuliini kasulikkus ulatub ksenotransplantaatide moodustamiseni immuunpuudulikkusega hiirtel, mis on väärtuslikud ravimite testimiseks, retseptori staatuse muutuste jälgimiseks ja angiogeneesi uurimiseks.

Lisaks sellele on T-47D rakuliin ressurss vähi geenide uurimiseks, mis annab ülevaate rinnanäärmevähki põhjustavast genoomilisest ja proteoomilisest maastikust. Rinnavähi proteoomilise ja transkriptoomilise profiili sügavamat mõistmist hõlbustades aitab t47d rinnavähi rakuliin kaasa uute rinnavähi rakkude fenotüüpide tuvastamisele ja sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamisele.

T47D rakud on aidanud uurida hormoonide, nagu progesteroon, mõju rinnavähile, andes ülevaate transkriptsiooni regulatsioonist, ravimiresistentsusest ja ksenotransplantaadi mudelite väljatöötamisest ravikatsete tegemiseks.

Kude
Rind
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Karyotüüp
Režiim = 66, ditsentrilised ja eriti pikad submetatsentrilised kromosoomid

04Tunnused

Viide
T47D (Cytioni katalooginumber 300353)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Östradiool, steroidid, kaltsitoniin, androgeen, progesteroon, glükokortikoid, prolaktiin, östrogeen
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Onkogeenid
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Mutatsiooniprofiil
TP53 mut

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 10 mikrogrammi/ml HREC insuliini
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
54 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia