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T47D
Tissue
Sein
Disease
Carcinome canalaire invasif
Metastatic site
Épanchement pleural
Synonyms
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

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T47D

Cell line · Product number 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire T47D, issue de l’épanchement pleural d’un carcinome canalaire infiltrant du sein, est devenue une ressource essentielle dans la recherche sur le cancer du sein. Les cellules T47D se distinguent dans le domaine de la recherche sur le cancer par leur profil d’expression hormonale, notamment parce qu’elles possèdent des récepteurs pour l’estradiol 17-bêta, divers autres stéroïdes et la calcitonine. De plus, les cellules T47D expriment l’oncogène WNT7B.

Les cellules T47D se distinguent par le fait que l’expression de leur récepteur de la progestérone n’est pas régulée par l’estradiol, malgré l’abondance de cette hormone au sein des cellules, ce qui les différencie des cellules MCF7, largement reconnues pour leur positivité aux récepteurs d’œstrogènes et fréquemment utilisées pour étudier le rôle des œstrogènes dans la prolifération tumorale et la réponse aux traitements.

L’utilité de la lignée cellulaire T47D s’étend à la formation de xénogreffes chez des souris immunodéficientes, ce qui est précieux pour les essais de médicaments, l’observation des changements de statut des récepteurs et l’étude de l’angiogenèse.

De plus, la lignée cellulaire T-47D constitue une ressource pour les études sur les gènes du cancer, offrant un aperçu du paysage génomique et protéomique à l’origine du cancer du sein. En facilitant une meilleure compréhension des profils protéomiques et transcriptomiques du cancer du sein, la lignée cellulaire T47D contribue à l’identification de nouveaux phénotypes de cellules cancéreuses du sein et au développement de thérapies ciblées.

Les cellules T47D ont joué un rôle déterminant dans l’étude des effets d’hormones telles que la progestérone sur le cancer du sein, offrant des informations sur la régulation transcriptionnelle, la résistance aux médicaments et le développement de modèles de xénogreffes pour les essais thérapeutiques.

Tissue
Sein
Disease
Carcinome canalaire invasif
Metastatic site
Épanchement pleural
Synonyms
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Tumourigenic
Oui, chez les souris nues
Karyotype
Mode = 66, chromosomes dicentriques et sous-métacentriques extra-longs

04Identifiers

Citation
T47D (numéro de catalogue Cytion 300353)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
estradiol, stéroïdes, calcitonine, androgènes, progestérone, glucocorticoïdes, prolactine, œstrogènes
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Oncogenes
Wnt3+, Wnt7h+, Wnt7b+
Mutational profile
mutation du gène TP53

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 10 microgrammes/ml d'insuline HREC
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
1 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
54 ans
Ethnicity
caucasien