- Tissue
- Sein
- Disease
- Carcinome canalaire invasif
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D
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T47D
Cell line · Product number 300353
The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire T47D, issue de l’épanchement pleural d’un carcinome canalaire infiltrant du sein, est devenue une ressource essentielle dans la recherche sur le cancer du sein. Les cellules T47D se distinguent dans le domaine de la recherche sur le cancer par leur profil d’expression hormonale, notamment parce qu’elles possèdent des récepteurs pour l’estradiol 17-bêta, divers autres stéroïdes et la calcitonine. De plus, les cellules T47D expriment l’oncogène WNT7B.
Les cellules T47D se distinguent par le fait que l’expression de leur récepteur de la progestérone n’est pas régulée par l’estradiol, malgré l’abondance de cette hormone au sein des cellules, ce qui les différencie des cellules MCF7, largement reconnues pour leur positivité aux récepteurs d’œstrogènes et fréquemment utilisées pour étudier le rôle des œstrogènes dans la prolifération tumorale et la réponse aux traitements.
L’utilité de la lignée cellulaire T47D s’étend à la formation de xénogreffes chez des souris immunodéficientes, ce qui est précieux pour les essais de médicaments, l’observation des changements de statut des récepteurs et l’étude de l’angiogenèse.
De plus, la lignée cellulaire T-47D constitue une ressource pour les études sur les gènes du cancer, offrant un aperçu du paysage génomique et protéomique à l’origine du cancer du sein. En facilitant une meilleure compréhension des profils protéomiques et transcriptomiques du cancer du sein, la lignée cellulaire T47D contribue à l’identification de nouveaux phénotypes de cellules cancéreuses du sein et au développement de thérapies ciblées.
Les cellules T47D ont joué un rôle déterminant dans l’étude des effets d’hormones telles que la progestérone sur le cancer du sein, offrant des informations sur la régulation transcriptionnelle, la résistance aux médicaments et le développement de modèles de xénogreffes pour les essais thérapeutiques.
- Tissue
- Sein
- Disease
- Carcinome canalaire invasif
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- T-47-D
- T47-D
- T47D:A
- T47D
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Tumourigenic
- Oui, chez les souris nues
- Karyotype
- Mode = 66, chromosomes dicentriques et sous-métacentriques extra-longs
04Identifiers
- Citation
- T47D (numéro de catalogue Cytion 300353)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0553
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- estradiol, stéroïdes, calcitonine, androgènes, progestérone, glucocorticoïdes, prolactine, œstrogènes
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
- Oncogenes
- Wnt3+, Wnt7h+, Wnt7b+
- Mutational profile
- mutation du gène TP53
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS et 10 microgrammes/ml d'insuline HREC
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- 1 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Post-thaw recovery
- Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 54 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes