- Tissue
- שד
- Disease
- קרצינומה דוקטלית פולשנית
- Metastatic site
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
- Synonyms
- T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D
Documents
T47D
Cell line · Product number 300353
The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים T47D, שמקורו בהצטברות נוזלים בחלל הצדר של קרצינומה דוקטלית חודרנית בשד, הפך למשאב חיוני במחקר סרטן השד. תאי T-47D הם ייחודיים בתחום מחקר הסרטן בשל פרופיל הביטוי ההורמונלי שלהם, במיוחד בשל היותם נושאים קולטנים ל-17 בטא אסטרדיול, סטרואידים שונים אחרים וקלציטונין. בנוסף, תאי T47D מבטאים את האונקוגן WNT7B.
תאי T47D בולטים בכך שהביטוי של קולטני הפרוגסטרון בהם אינו מוסדר על ידי אסטרדיול, למרות שפע ההורמון בתאים, מה שמבדיל אותם מתאי MCF7, המוכרים בזכות הביטוי החיובי של קולטני האסטרוגן בהם ומשמשים לעתים קרובות לחקר תפקידו של האסטרוגן בהתפשטות הגידול ובתגובה לטיפולים.
השימוש בקו התאים T47D משתרע על יצירת שתלים זרים בעכברים עם חוסר חיסוני, המשמשים לבדיקת תרופות, תצפית על שינויים במצב הקולטנים וחקר אנגיוגנזה.
יתר על כן, קו התאים T-47D מהווה משאב למחקרים על גנים סרטניים, ומספק תובנות על הנוף הגנומי והפרוטאומי המניע את סרטן השד. על ידי הקלת הבנה מעמיקה יותר של הפרופילים הפרוטאומיים והטרנסקריפטומיים של סרטן השד, קו התאים t47d של סרטן השד מסייע בזיהוי פנוטיפים חדשים של תאי סרטן השד ובפיתוח טיפולים ממוקדים.
תאי T47D היו מכריעים במחקר ההשפעות של הורמונים כמו פרוגסטרון על סרטן השד, והם מספקים תובנות לגבי ויסות שעתוק, עמידות לתרופות ופיתוח מודלים של שתלים זרים לבדיקות טיפוליות.
- Tissue
- שד
- Disease
- קרצינומה דוקטלית פולשנית
- Metastatic site
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
- Synonyms
- T-47-D
- T47-D
- T47D:A
- T47D
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
- Karyotype
- מצב = 66, כרומוזומים דיצנטריים ואקסטרה-ארוכים תת-מרכזיים
04Identifiers
- Citation
- T47D (מספר קטלוגי Cytion 300353)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0553
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- אסטרדיול, סטרואידים, קלציטונין, אנדרוגן, פרוגסטרון, גלוקוקורטיקואיד, פרולקטין, אסטרוגן
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
- Oncogenes
- Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
- Mutational profile
- מוטציה TP53
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS, 10 מיקרוגרם/מ"ל אינסולין HREC
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 54 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes