Przejdź do treści
T47D
Chusteczka
Pierś
Choroba
Inwazyjny rak przewodowy
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Dokumenty

T47D

Cell line · Numer produktu 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa T47D, pochodząca z wysięku opłucnowego naciekającego raka przewodowego piersi, stała się kluczowym źródłem w badaniach nad rakiem piersi. Komórki T-47D są unikalne w dziedzinie badań nad rakiem ze względu na ich profil ekspresji hormonalnej, w szczególności w zakresie przenoszenia receptorów dla 17 beta estradiolu, różnych innych steroidów i kalcytoniny. Dodatkowo, komórki T47D wykazują ekspresję onkogenu WNT7B.

Komórki T47D wyróżniają się tym, że ich ekspresja receptora progesteronu nie jest regulowana przez estradiol, pomimo obfitości hormonu w komórkach, co odróżnia je od komórek MCF7, które są powszechnie rozpoznawane ze względu na ich pozytywny wpływ na receptor estrogenu i są często wykorzystywane do badania roli estrogenu w proliferacji guza i odpowiedzi na terapie.

Użyteczność linii komórkowej T47D rozciąga się na tworzenie ksenograftów u myszy z niedoborem odporności, które są cenne do testowania leków, obserwowania zmian statusu receptora i badania angiogenezy.

Co więcej, linia komórkowa T-47D jest zasobem do badań genów nowotworowych, zapewniając wgląd w genomiczny i proteomiczny krajobraz, który napędza raka piersi. Ułatwiając głębsze zrozumienie profili proteomicznych i transkryptomicznych raka piersi, linia komórkowa raka piersi t47d pomaga w identyfikacji nowych fenotypów komórek raka piersi i opracowywaniu ukierunkowanych terapii.

Komórki T47D odegrały kluczową rolę w badaniu wpływu hormonów, takich jak progesteron, na raka piersi, oferując wgląd w regulację transkrypcji, oporność na leki i rozwój modeli ksenoprzeszczepów do testów terapeutycznych.

Chusteczka
Pierś
Choroba
Inwazyjny rak przewodowy
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy
Karyotyp
Tryb = 66, chromosomy dicentryczne i bardzo długie chromosomy submetacentryczne

04Identyfikatory

Źródło
T47D (numer katalogowy Cytion 300353)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Estradiol, steroidy, kalcytonina, androgen, progesteron, glukokortykoid, prolaktyna, estrogen
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Onkogeny
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Profil mutacji
TP53 mut

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 10 mikrogramów/ml insuliny HREC
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
54 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski