Vai al contenuto
T47D
Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma duttale invasivo
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Documenti

T47D

Cell line · Codice prodotto 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare T47D, proveniente dal versamento pleurico di un carcinoma duttale infiltrante della mammella, è diventata una risorsa fondamentale nella ricerca sul cancro al seno. Le cellule T-47D sono uniche nel campo della ricerca sul cancro per il loro profilo di espressione ormonale, in particolare per la presenza di recettori per il 17 beta estradiolo, vari altri steroidi e la calcitonina. Inoltre, le cellule T47D esprimono l'oncogene WNT7B.

Le cellule T47D si distinguono per il fatto che l'espressione del recettore del progesterone non è regolata dall'estradiolo, nonostante l'abbondanza dell'ormone all'interno delle cellule, il che le differenzia dalle cellule MCF7, ampiamente riconosciute per la positività del recettore degli estrogeni e spesso utilizzate per esplorare il ruolo degli estrogeni nella proliferazione tumorale e nella risposta alle terapie.

L'utilità della linea cellulare T47D si estende alla formazione di xenotrapianti in topi immunodeficienti, utili per la sperimentazione di farmaci, l'osservazione delle variazioni dello stato recettoriale e lo studio dell'angiogenesi.

Inoltre, la linea cellulare T-47D è una risorsa per gli studi sui geni del cancro, che fornisce approfondimenti sul panorama genomico e proteomico che guida il cancro al seno. Facilitando una comprensione più approfondita dei profili proteomici e trascrittomici del tumore al seno, la linea cellulare di tumore al seno T-47D contribuisce all'identificazione di nuovi fenotipi cellulari di tumore al seno e allo sviluppo di terapie mirate.

Le cellule T47D sono state fondamentali per studiare gli effetti di ormoni come il progesterone sul cancro al seno, offrendo approfondimenti sulla regolazione trascrizionale, sulla resistenza ai farmaci e sullo sviluppo di modelli di xenotrapianto per la sperimentazione terapeutica.

Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma duttale invasivo
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi
Cariotipo
Modalità = 66, cromosomi dicentrici e submetacentrici extra lunghi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
T47D (numero di catalogo Cytion 300353)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Estradiolo, steroidi, calcitonina, androgeni, progesterone, glucocorticoidi, prolattina, estrogeno
Isoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Oncogeni
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Profilo mutazionale
TP53 mut

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con 10% FBS, 10 microgrammi/ml di insulina HREC
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
54 anni
Etnia
Caucasico