Ga naar de inhoud
T47D
Weefsel
Borst
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
T-47-D, T47-D, T47D:A, T47D

Documenten

T47D

Cell line · Productnummer 300353

The T47D cell line, originating from the pleural effusion of an infiltrating ductal carcinoma of the breast, has become a critical resource in breast canc...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De T47D-cellijn, afkomstig uit de pleurale effusie van een infiltrerend ductaal carcinoom van de borst, is een essentiële bron voor borstkankeronderzoek geworden. T-47D cellen zijn uniek op het gebied van kankeronderzoek vanwege hun hormonale expressieprofiel, met name omdat ze receptoren dragen voor 17 bèta-oestradiol, verschillende andere steroïden en calcitonine. Bovendien brengen T47D cellen het WNT7B oncogen tot expressie.

T47D cellen vallen op doordat hun progesteronreceptorexpressie niet wordt gereguleerd door oestradiol, ondanks dat het hormoon overvloedig aanwezig is in de cellen, waardoor ze zich onderscheiden van MCF7 cellen, die algemeen bekend staan om hun oestrogeenreceptorpositiviteit en vaak worden gebruikt om de rol van oestrogeen in tumorproliferatie en respons op therapieën te onderzoeken.

Het nut van de T47D cellijn strekt zich uit tot de vorming van xenograften in immunodeficiënte muizen, die waardevol zijn voor het testen van medicijnen, het observeren van veranderingen in de receptorstatus en het bestuderen van angiogenese.

Bovendien is de T-47D cellijn een bron voor onderzoek naar kankergenen, waardoor inzicht wordt verkregen in het genomische en proteomische landschap dat de motor is achter borstkanker. Door een beter begrip te krijgen van de proteomische en transcriptomische profielen van borstkanker, helpt de t47d-borstkankercellijn bij de identificatie van nieuwe fenotypes van borstkankercellen en de ontwikkeling van doelgerichte therapieën.

T47D-cellen hebben een belangrijke rol gespeeld bij het bestuderen van de effecten van hormonen zoals progesteron op borstkanker en bieden inzicht in transcriptieregulatie, geneesmiddelenresistentie en de ontwikkeling van xenograft-modellen voor therapeutische tests.

Weefsel
Borst
Ziekte
Invasief ductaal carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • T-47-D
  • T47-D
  • T47D:A
  • T47D

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen
Karyotype
Modus = 66, dicentrische en extra lange submetacentrische chromosomen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
T47D (Cytion catalogusnummer 300353)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0553

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Estradiol, steroïden, calcitonine, androgeen, progesteron, glucocorticoïde, prolactine, oestrogeen
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 2, Ak-1, 1, GLO-1, 1-2
Oncogenen
Wnt3 +, wnt7h +, wnt7b+
Mutatieprofiel
TP53 mutatie

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 10 microgram/ml HREC insuline
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
54 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch