SF188
Cell line · Product number 305870
The SF188 cell line is a human glioblastoma multiforme (GBM) model established from a pediatric patient. It is used extensively to study the mechanisms of...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire SF188 est un modèle de glioblastome multiforme (GBM) humain issu d’un patient pédiatrique. Elle est largement utilisée pour étudier les mécanismes de résistance à la chimiothérapie, en particulier aux agents alkylants tels que la 1,3-bis(2-chloroéthyl)-1-nitrosourée (BCNU). Comparativement à d’autres lignées cellulaires dérivées de gliomes, comme la SF126, la SF188 présente une résistance nettement plus élevée à la cytotoxicité et à la génotoxicité induites par le BCNU. Plus précisément, la lignée SF188 présente une résistance environ trois fois supérieure lors des tests de survie et une susceptibilité 14 fois plus faible à l’échange de chromatides sœurs (SCE) induit par le BCNU, ce qui indique un phénotype de tolérance aux dommages à l’ADN très marqué.
La résistance de SF188 est attribuée à une capacité accrue de réparation de l’ADN, en particulier à l’élimination rapide et efficace des adduits d’O6-alkylguanine. Lorsqu’elles sont exposées à des agents méthylants comme la N-méthyl-N-nitrosourée, les cellules SF188 démontrent une élimination marquée des lésions de O6-méthylguanine, tandis que les lignées cellulaires plus sensibles ne présentent qu’une activité de réparation minimale. Cette réparation efficace des lésions empêche probablement la formation de liaisons croisées entre brins, préservant ainsi l’intégrité génomique et augmentant la survie cellulaire. Il est important de noter que la lignée SF188 présente également un nombre élevé de chromosomes (nombre modal de 91) et ne présente pas d’expression de la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP), ce qui confirme son origine de gliome peu différencié et en fait un excellent modèle pour étudier l’interaction entre la réparation de l’ADN et la chimiorésistance dans les gliomes de haut grade.
- Tissue
- Cerveau, lobe frontal droit
- Disease
- Glioblastome
- Synonyms
- SF-188
- SF 188
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 26 heures
04Identifiers
- Citation
- SF188 (numéro de catalogue Cytion 305870)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6948
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutation : TP53, simple, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozygote (PubMed=9614553, PubMed=10416987).
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 8 ans
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Disclaimer
- Nos cellules sont fournies exclusivement à des fins de recherche in vitro en laboratoire et ne sont pas destinées à un usage clinique ou diagnostique; elles ne doivent pas non plus être administrées à des humains ni utilisées à des fins vétérinaires. Les utilisateurs doivent respecter toutes les lignes directrices et tous les règlements applicables concernant la manipulation et l’utilisation de ces cellules dans un contexte de recherche.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
