Preskoči na vsebino
SF188
Tkivo
Možgani, desni čelni rež
Bolezen
Glioblastom
Sinonimi
SF-188, SF 188

Dokumenti

SF188

Cell line · Številka izdelka 305870

Celična linija SF188 je model človeškega glioblastoma multiforme (GBM), vzpostavljen na podlagi vzorca pediatričnega bolnika. Široko se uporablja za preučevanje mehanizmov...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija SF188 je model človeškega glioblastoma multiforme (GBM), vzpostavljen na podlagi pediatričnega bolnika. Široko se uporablja za preučevanje mehanizmov odpornosti na kemoterapijo, zlasti na alkilacijska sredstva, kot je 1,3-bis(2-kloroetil)-1-nitrozourea (BCNU). V primerjavi z drugimi celičnimi linijami, izpeljanimi iz glioma, kot je SF126, SF188 kaže znatno večjo odpornost proti citotoksičnosti in genotoksičnosti, ki ju povzroča BCNU. Natančneje, SF188 kaže približno trikrat večjo odpornost v testih preživetja in 14-krat manjšo občutljivost na z BCNU povzročeno izmenjavo sestrskih kromatid (SCE), kar kaže na močan fenotip tolerance na poškodbe DNK.

Odpornost linije SF188 se pripisuje izboljšani sposobnosti popravljanja DNK, zlasti hitremu in učinkovitemu odstranjevanju aduktov O6-alkilguanina. Ob izpostavljenosti metilirnim sredstvom, kot je N-metil-N-nitrozourea, celice SF188 kažejo izrazito odstranjevanje poškodb O6-metilguanina, medtem ko bolj občutljive celične linije kažejo minimalno popravljalno aktivnost. To učinkovito popravljanje poškodb verjetno preprečuje nastajanje medverigovnih križnih vezi, s čimer ohranja genomsko integriteto in povečuje preživetje celic. Pomembno je, da SF188 kaže tudi visoko število kromosomov (modalno število 91) in da v njej ni izražanja glialnega fibrilarnega kislega proteina (GFAP), kar potrjuje njen slabo diferenciran gliomski izvor in jo naredi odličen model za preučevanje medsebojnega delovanja med popravljanjem DNK in kemoresistenco pri visokostopenjskih gliomih.

Tkivo
Možgani, desni čelni rež
Bolezen
Glioblastom
Sinonimi
  • SF-188
  • SF 188

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Čas podvojitve
26 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
SF188 (kataloška številka Cytion 305870)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: TP53, preprosta, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozigotna (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 do 4 × 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
8 let