SF188
Cell line · Product number 305870
The SF188 cell line is a human glioblastoma multiforme (GBM) model established from a pediatric patient. It is used extensively to study the mechanisms of...
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01General information
- Description
SF188 細胞系是從一名兒童患者建立的人類多形性膠質母細胞瘤(GBM)模型。 該細胞系被廣泛用於研究化療耐藥的機制,特別是針對烷化劑(如 1,3-雙(2-氯乙基)-1-亞硝基脲 (BCNU))的耐藥機制。 與 SF126 等其他源自膠質瘤的細胞系相比,SF188 對 BCNU 誘導的細胞毒性及基因毒性展現出顯著更高的耐受性。 具體而言,在存活試驗中,SF188 對 BCNU 誘導的細胞毒性表現出約三倍的耐受性,且對 BCNU 誘導的姊妹染色單體交換 (SCE) 的敏感性降低了 14 倍,這表明其具有強大的 DNA 損傷耐受表型。
SF188 的抗性歸因於增強的 DNA 修復能力,尤其是對 O6-烷基鳥嘌呤加合物的快速且高效的清除。 當暴露於 N-甲基-N-亞硝基脲等甲基化劑時,SF188 細胞展現出顯著的 O6-甲基鳥嘌呤損傷清除能力,而較敏感的細胞系則僅顯示出極低的修復活性。這種高效的損傷修復很可能防止了鏈間交聯的形成,從而維持了基因組完整性並提高了細胞存活率。 重要的是,SF188 還具有較高的染色體數目(模數為 91),且不表達膠質纖維酸性蛋白(GFAP),這證實了其源自分化程度低的膠質瘤,並使其成為研究高惡性度膠質瘤中 DNA 修復與化療抗藥性之間相互作用的絕佳模型。
- Tissue
- 大腦,右額葉
- Disease
- 膠質母細胞瘤
- Synonyms
- SF-188
- SF 188
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 26 小時
04Identifiers
- Citation
- SF188(Cytion 型號 305870)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6948
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- 突變:TP53,簡單突變,p.Gly266Glu (c.797G>A),純合子(PubMed=9614553,PubMed=10416987)。
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 2 至 4 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 8年
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用,不得用於臨床或診斷用途,亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
