Gå til innholdet
SF188
Vev
Hjernen, høyre frontallapp
Sykdom
Glioblastom
Synonymer
SF-188, SF 188

Dokumenter

SF188

Cell line · Produktnummer 305870

Cellelinjen SF188 er en modell av humant glioblastoma multiforme (GBM) som er utviklet fra en barnepasient. Den brukes i stor utstrekning til å studere mekanismene bak...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

SF188-cellelinjen er en modell for humant glioblastoma multiforme (GBM) som er etablert fra en barnepasient. Den brukes mye til å studere mekanismene bak resistens mot kjemoterapi, særlig mot alkylerende midler som 1,3-bis(2-kloroetyl)-1-nitrosourea (BCNU). Sammenlignet med andre gliom-avledede cellelinjer som SF126, viser SF188 betydelig høyere resistens mot BCNU-indusert cytotoksisitet og genotoksisitet. Spesielt viser SF188 omtrent tre ganger større resistens i overlevelsesanalyser og 14 ganger lavere følsomhet for BCNU-indusert søsterkromatidutveksling (SCE), noe som indikerer en robust fenotype for DNA-skadetoleranse.

Resistensen i SF188 tilskrives forbedret DNA-reparasjonsevne, spesielt den raske og effektive fjerningen av O6-alkylguanin-addukter. Ved eksponering for metyleringsmidler som N-metyl-N-nitrosourea viser SF188-celler markert fjerning av O6-metylguaninlesjoner, mens mer følsomme cellelinjer viser minimal reparasjonsaktivitet. Denne effektive lesjonsreparasjonen forhindrer sannsynligvis dannelsen av kryssbindinger mellom strenger, og opprettholder dermed genomisk integritet og øker celleoverlevelsen. Det er viktig å merke seg at SF188 også har et høyt kromosantall (modalt antall 91) og mangler uttrykk for glialfibrillært surt protein (GFAP), noe som bekrefter dets dårlig differensierte gliomopprinnelse og gjør det til en utmerket modell for å studere samspillet mellom DNA-reparasjon og kjemoresistens i høygradige gliomer.

Vev
Hjernen, høyre frontallapp
Sykdom
Glioblastom
Synonymer
  • SF-188
  • SF 188

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Fordoblingstid
26 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SF188 (Cytion-katalognummer 305870)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: TP53, enkel, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozygot (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 til 4 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
8 år