Ga naar de inhoud
SF188
Weefsel
Hersenen, rechter frontale kwab
Ziekte
Glioblastoom
Synoniemen
SF-188, SF 188

Documenten

SF188

Cell line · Productnummer 305870

De SF188-cellijn is een model van humaan glioblastoma multiforme (GBM) dat is ontwikkeld op basis van een pediatrische patiënt. Deze cellijn wordt op grote schaal gebruikt voor onderzoek naar de mechanismen van...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De SF188-cellijn is een model van humaan glioblastoma multiforme (GBM) dat is ontwikkeld op basis van een pediatrische patiënt. Deze wordt op grote schaal gebruikt om de mechanismen van chemotherapeutische resistentie te bestuderen, met name tegen alkylerende middelen zoals 1,3-bis(2-chloorethyl)-1-nitrosoureum (BCNU). In vergelijking met andere van glioom afgeleide cellijnen, zoals SF126, vertoont SF188 een aanzienlijk hogere resistentie tegen door BCNU geïnduceerde cytotoxiciteit en genotoxiciteit. Meer specifiek vertoont SF188 een ongeveer driemaal grotere resistentie in overlevingstests en een 14-voudig lagere gevoeligheid voor door BCNU geïnduceerde zusterchromatide-uitwisseling (SCE), wat wijst op een robuust fenotype van DNA-schadetolerantie.

De resistentie in SF188 wordt toegeschreven aan een verbeterd DNA-herstelvermogen, met name de snelle en efficiënte verwijdering van O6-alkylguanine-adducten. Bij blootstelling aan methylerende middelen zoals N-methyl-N-nitrosoureum vertonen SF188-cellen een opvallende verwijdering van O6-methylguanine-laesies, terwijl meer gevoelige cellijnen minimale reparatieactiviteit vertonen. Dit efficiënte herstel van laesies voorkomt waarschijnlijk de vorming van crosslinks tussen de DNA-strengen, waardoor de genomische integriteit behouden blijft en de celoverleving toeneemt. Belangrijk is dat SF188 ook een hoog aantal chromosomen vertoont (modaal aantal 91) en geen expressie van gliaal fibrillair zuur eiwit (GFAP) vertoont, wat de slecht gedifferentieerde glioom-oorsprong bevestigt en het tot een uitstekend model maakt voor het bestuderen van de wisselwerking tussen DNA-reparatie en chemoresistentie bij hooggradige gliomen.

Weefsel
Hersenen, rechter frontale kwab
Ziekte
Glioblastoom
Synoniemen
  • SF-188
  • SF 188

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Verdubbelingstijd
26 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SF188 (Cytion-catalogusnummer 305870)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: TP53, eenvoudig, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozygoot (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 tot 4 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
8 jaar