SF188

A linha celular SF188 é um modelo de glioblastoma multiforme (GBM) humano estabelecido a partir de um doente pediátrico. É amplamente utilizada para estudar os mecanismos de resistência à quimioterapia, particularmente a agentes alquilantes, como a 1,3-bis(2-cloroetil)-1-nitrosoureia (BCNU). Em comparação com outras linhas celulares derivadas de gliomas, como a SF126, a SF188 apresenta uma resistência significativamente maior à citotoxicidade e genotoxicidade induzidas pelo BCNU. Mais especificamente, a SF188 apresenta uma resistência aproximadamente três vezes superior em ensaios de sobrevivência e uma suscetibilidade 14 vezes menor à troca de cromátides irmãs (SCE) induzida pelo BCNU, o que indica um fenótipo robusto de tolerância a danos no ADN.

A resistência da SF188 é atribuída a uma capacidade de reparação do ADN reforçada, especialmente à remoção rápida e eficiente de adutos de O⁶-^alquilguanina. Após exposição a agentes metilantes como a N-metil-N-nitrosoureia, as células SF188 demonstram uma remoção acentuada das lesões ^de O⁶-met^ilguanina, enquanto as linhas celulares mais sensíveis apresentam uma atividade de reparação mínima. Esta reparação eficiente das lesões previne provavelmente a formação de ligações cruzadas entre cadeias, mantendo assim a integridade genómica e aumentando a sobrevivência celular. É importante referir que a SF188 também apresenta uma elevada contagem cromossómica (número modal de 91) e não expressa a proteína ácida fibrilar glial (GFAP), o que confirma a sua origem em glioma pouco diferenciado e a torna um excelente modelo para estudar a interação entre o reparo do ADN e a quimiorresistência em gliomas de alto grau.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia