Tartalomra ugrás
SF188
Szövet
Agy, jobb frontális lebeny
Betegség
Glioblastoma
Szinonimák
SF-188, SF 188

Dokumentumok

SF188

Cell line · Termékszám 305870

Az SF188 sejtvonal egy gyermekbetegből létrehozott humán glioblastoma multiforme (GBM) modell. Széles körben alkalmazzák a… mechanizmusainak vizsgálatára…

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az SF188 sejtvonal egy gyermekbetegből létrehozott humán glioblastoma multiforme (GBM) modell. Széles körben használják a kemoterápiás rezisztencia mechanizmusainak vizsgálatára, különösen olyan alkilező szerekkel szemben, mint az 1,3-bis(2-klór-etil)-1-nitrozourea (BCNU). Más gliómából származó sejtvonalakhoz, például az SF126-hoz képest az SF188 szignifikánsan nagyobb rezisztenciát mutat a BCNU által kiváltott citotoxicitás és genotoxicitás ellen. Konkrétan az SF188 a túlélési vizsgálatokban körülbelül háromszor nagyobb rezisztenciát, a BCNU által kiváltott testvérkromatid-csere (SCE) iránt pedig 14-szer alacsonyabb fogékonyságot mutat, ami robusztus DNS-károsodás-tolerancia fenotípusra utal.

Az SF188 rezisztenciáját a fokozott DNS-javító képességnek tulajdonítják, különösen az O6-alkilguanin-adduktok gyors és hatékony eltávolításának. N-metil-N-nitrozourea-hoz hasonló metiláló szereknek való kitettség esetén az SF188 sejtek az O6-metilguanin-léziók jelentős eltávolítását mutatják, míg az érzékenyebb sejtvonalaknál a javító aktivitás minimális. Ez a hatékony léziójavítás valószínűleg megakadályozza a szálak közötti keresztkötések kialakulását, ezáltal fenntartva a genom integritását és növelve a sejtek túlélését. Fontos kiemelni, hogy az SF188 magas kromoszómaszámmal (modális érték: 91) rendelkezik, és nem expresszálja a gliafibrilláris savas fehérjét (GFAP), ami megerősíti alacsony differenciáltságú glióma eredetét, és kiváló modellé teszi a magas fokozatú gliómákban a DNS-javítás és a kemoterápiás rezisztencia közötti kölcsönhatás tanulmányozásához.

Szövet
Agy, jobb frontális lebeny
Betegség
Glioblastoma
Szinonimák
  • SF-188
  • SF 188

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Kettőzési idő
26 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
SF188 (Cytion katalógusszám: 305870)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
Mutáció: TP53, egyszerű, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozigóta (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
8 év