SF188

Linia komórkowa SF188 stanowi model ludzkiego glejaka wielopostaciowego (GBM) wyhodowany z tkanki pacjenta pediatrycznego. Jest ona szeroko wykorzystywana do badania mechanizmów oporności na chemioterapię, w szczególności na środki alkilujące, takie jak 1,3-bis(2-chloroetylo)-1-nitrozomocznik (BCNU). W porównaniu z innymi liniami komórkowymi pochodzącymi z glejaka, takimi jak SF126, SF188 wykazuje znacznie wyższą oporność na cytotoksyczność i genotoksyczność wywołaną przez BCNU. W szczególności linia SF188 wykazuje około trzykrotnie większą oporność w testach przeżywalności oraz 14-krotnie mniejszą podatność na indukowaną przez BCNU wymianę chromatyd siostrzanych (SCE), co wskazuje na silny fenotyp tolerancji uszkodzeń DNA.

Odporność linii SF188 przypisuje się zwiększonej zdolności do naprawy DNA, a zwłaszcza szybkiemu i skutecznemu usuwaniu adduktów O⁶-alk^iloguaniny. Po ekspozycji na czynniki metylujące, takie jak N-metylo-N-nitrozomocznik, komórki SF188 wykazują wyraźne usuwanie uszkodzeń typu O⁶-metyloguaniny, podczas gdy bardziej wrażliwe linie komórkowe wykazują minimalną aktywność naprawczą. Ta skuteczna naprawa uszkodzeń prawdopodobnie zapobiega tworzeniu się wiązań krzyżowych między niciami DNA, utrzymując w ten sposób integralność genomu i zwiększając przeżywalność komórek. Co istotne, linia SF188 charakteryzuje się również dużą liczbą chromosomów (liczba modalna 91) oraz brakiem ekspresji kwaśnego białka włóknistego gleju (GFAP), co potwierdza jej pochodzenie z glejaka o niskim stopniu zróżnicowania i czyni ją doskonałym modelem do badania wzajemnego oddziaływania między naprawą DNA a opornością na chemioterapię w glejakach wysokiego stopnia złośliwości.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym